腹泻型肠易激综合征患者结肠黏膜组织异常表达蛋白质的筛选与鉴定

【摘要】　目的　筛选及鉴定腹泻型肠易激综合征(D2IBS)患者与正常人结肠黏膜组织中的差异表达蛋白。方法　D2IBS 患者及健康志愿者各4 例,分别为D2IBS 组和正常对照组。通过结肠镜取回盲部及乙状结肠黏膜进行活检,用含011 % PMSF 的冰盐水将标本洗净后立即置于液氮中保存。提取蛋白质,采用双向凝胶电泳法筛选差异表达蛋白,并采用质谱法对变化最明显的蛋白点进行鉴定。结果　利用双向凝胶电泳技术成功得到人结肠黏膜组织的蛋白质组图谱。正常对照组图谱平均得到蛋白点336 个,组内图像平均匹配率92 %,D2IBS 组图谱平均得到蛋白点426 个,组内图像平均匹配率95 %。D2IBS 组与正常对照组之间进行平均胶图谱的比较,两组间匹配率为74 %。Volume 值变化大于2 倍以上的点共24 个,其中21 个点表达上调,3 个点表达下调。表达上调最明显的2 个蛋白点经鉴定分别为免疫球蛋白J 链(Ig2j)和热休克蛋白27(HSP27) ,表达下调最明显的2 个蛋白点则分别为血红蛋白β亚基和果糖二磷酸醛缩酶A。结论　采用双向凝胶电泳法可以成功得到人结肠黏膜组织蛋白质组表达图谱,D2IBS 患者与正常人结肠黏膜组织蛋白质表达存在差异,已经鉴定出来的4 个蛋白可能在D2IBS 的发病机制中起一定作用。