降纤酶的分离纯化及其性质

摘　要: 蛇毒蛋白对抑制血栓形成和溶解血栓具有较好的疗效, 但由于得不到性质稳定、组分单一的酶蛋白, 影响了其临床效果。该研究通过亲和层析方法, 从长白山白眉蝮蛇乌苏里种蛇毒中分离提纯到SDS2PA GE 图谱为单一组分糖蛋白——降纤酶, 相对分子质量约3. 6×104。该酶具有体外凝血、体内抗凝作用。等电点约为4. 25。HPLC 分析结果表明其纯度为99%。最适温度为70 ℃, 最适pH= 8. 0。动力学研究表明该酶为一M ichaelis2M enten 酶, M ichaelis 常数为0. 320mmo löL , 最大反应速度为0. 117 Lmo löm in。EDTA ,M g2+ , Cu2+ 对其有抑制作用。测定该酶N 端20 个氨基酸的序列是V al IleGluGluA spGluCysA sn IleA snGluH isA rgPheL eu ,与其他的蛇毒类凝血酶有高度同源性。