烟草CuZnSOD 同工酶的分离纯化与鉴定

摘要: 利用硫酸铵盐析分级分离、乙醇- 氯仿沉淀除杂、丙酮再沉淀分级得到含铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD) 的粗酶液, 通过DEAE-52 离子交换层析实现了3 种CuZnSOD同工酶的拆分; 进一步通过G-75 凝胶层析对3 种同工酶分离纯化得到2 种电泳纯产品CuZnSOD Ⅰ和CuZnSOD Ⅲ; SDS- PAGE实验发现CuZnSOD Ⅰ由两个不等亚基组成, 亚基相对分子质量分别为15 050、20 950; CuZnSOD Ⅲ存在一种亚基, 亚基相对分子质量为22950; 实验检测到2 种纯酶分子含有不等量的Cu 和Zn , 酶学特性实验也证实了2 种蛋白酶都是CuZnSOD。