烟草过氧化物酶Ⅰ的分离纯化及部分光谱特性研究

上一篇 / 下一篇  2008-10-29 19:14:27/ 个人分类：分离纯化

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摘要:烟草过氧化物酶同工酶Ⅰ(TOP Ⅰ) 的分离纯化过程,主要包括匀浆、超声破碎、
过滤、(NH4) 2SO4 分级沉淀、DE252 纤维素阴离子交换层析、Sephadex G275 凝胶层析、DEAE2Sephadex A250 阴离子交换层析. 经纯化的TOP Ⅰ,纯化酶的比活力为4 826 U/mg ,在SDS2PAGE 上显示出一条蛋白带,分子量在21 000 左右,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI $ TOF2MS) 测得TOP Ⅰ分子量为21 888. 5 ,等电点pI 为3. 5 ;光谱学分析揭示,在402 nm 处有一典型的Soret 带,在498 nm 和636 nm 处有特征吸收峰,表明TOP Ⅰ为一含血红素的酸性蛋白酶. 酸度对TOPI 的在紫外可见区的特征吸收峰及荧光光谱均产生一定的影响,反映了TOP Ⅰ分子独特的光谱学特性.



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TAG: 光谱性质烟草纯化血红素过氧化物酶

 

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