去糖基猪卵透明带抗原DGZPB 和DGZPC 的分离纯化及免疫特性

[摘　要] 　目的:为发展避孕疫苗研究制备去糖基猪卵透明带抗原DGZPB 和DGZPC 并研究它们的免疫反应性。方法:从阉割小母猪采集的猪卵巢分离猪卵透明带,经热溶解,Sephacryl S - 400 和HTP 柱层析分离纯化抗原ZP3 , 经β- 半乳糖苷酶消化,用反相HPLC分离得部分去糖基的pZPB 和pZPC , 再用TFMS 处理,制备去糖基猪卵透明带抗原DGZPB 和DGZPC。以MDP 为佐剂,用DGZPB和DGZPC 分别免疫家兔。用ELISA 法测定抗血清与ZP3、DGZPB 和DGZPC 的反应。结果:用反相HPLC分离β- 半乳糖苷酶处理的ZP3 ,得部分去糖基Mr 为4. 6 ×104 的pZPB 和Mr 为412 ×104 的pZPC ,用TFMS 对部分去糖基pZPB 和pZPC 作化学去糖基分别得Mr 为317 ×104 的DGZPB 和Mr 为312 ×104 的DGZPC。DGZPB 和DGZPC免疫家兔均能诱发抗体反应,抗DGZPB 抗血清和抗DGZPC 抗血清能与ZP3 反应。但两种抗血清不发生交叉反应。结论:从猪卵巢可分离制备的去糖基卵透明带抗原DGZPB 和DGZPC , 用于免疫诱发的两种抗血清均能与ZP3 反应,但两种抗血清无交叉反应。