痹肿消汤干预胶原诱导性关节炎大鼠滑膜病变的蛋白质组学研究

摘要 目的, 观察痹肿消汤干预胶原诱导性关节炎大鼠滑膜病变的蛋白质改变#分析痹肿消汤治疗类风湿关节炎可能的作用机制。方法：实验于(%%$0%1 4 (%%10%( 在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室、卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室完成。)% 只5U 大鼠随机分为- 组，正常组"% 只，其余+% 只大鼠采用牛!型胶原与完全福氏佐剂诱导5U 大鼠实验性关节炎模型，选取造模成功者再随机分为两组，即痹肿消汤组和模型组。痹肿消汤煎液制备：白花蛇舌草"1 N，肿节风-% N，丹参"1 N，络石藤(% N，骨碎补"1 N，苡米-% N 等"1 味中药，双蒸水煎( 次，-% B<9 4 次，两煎混合，b$ 滤器过滤，于+% c水浴中浓缩成每毫升药液含生药""+ N。痹肿消汤组灌服痹肿消汤煎液"% B^ 4 ‘N（相当于生药+(W" N），( 次4 D 灌服；模型组灌服生理盐水"% B^ 4 ‘N，( 次4 D 灌服。正常组自由进水。应用双向凝胶电泳技术分别分离正常组、模型组及痹肿消汤组大鼠关节滑膜的总蛋白后，经胶体考染显色、图像分析、识别差异表达的蛋白质点，应用J/^U80EfV0J5 质谱仪得到相应的肽质量指纹图谱，然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果：纳入实验的)% 只大鼠，造模不成功被淘汰) 只，最终痹肿消汤组(+ 只、模型组() 只、对照组"% 只共+- 只大鼠进入结果分析。"建立了正常组、模型组和痹肿消汤组关节滑膜的双向凝胶电泳图谱，其平均蛋白质点数分别为*$)g-*，**$g$"，"%-"g1(，其匹配率为*(h，*"h，*$W(h。#发现并鉴定了正常组、模型组和痹肿消汤组大鼠滑膜的差异表达大于( 倍的蛋白质点11 个，这些差异表达蛋白质的功能涉及物质代谢、能量产生、物质转运、抗氧化应激、信号转导及细胞骨架蛋白，随即用免疫印迹的方法差异蛋白质G99>\<9 "、GHD?HG:> / 在正常组、模型组、痹肿消汤组中的表达，其结果也显示了类似的表达差异。结论：类风湿关节炎模型关节滑膜病变是一个多种蛋白质参与的复杂过程。滑膜组织的比较蛋白质组学分析是一种筛选病变相关蛋白的可方法之一。G99>\<9 "、GHD?HG:> / 可能与实验性关节炎的关节滑膜病变有关；痹肿消汤可能通过对实验性关节炎大鼠滑膜蛋白质表达的调控达到治疗目的。