酶催化分光光度法测定蛋白质

上一篇 / 下一篇  2008-12-22 15:22:31/ 个人分类：蛋白质

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摘　要　基于血清白蛋白对辣根过氧化物酶(HRP)催化H2O2 氧化邻苯二酚紫的反应具有强烈的抑制作用,建立了一种测定血清白蛋白的新方法。在优化的实验条件下: pH 4. 0 NaAc2HAc缓冲介质, (30 ±0. 2) ℃恒温反应10 min,以430 nm为测定波长,本方法测定牛血清白蛋白(BSA)线性范围为(0. 4～5. 0) ×10 - 7 mol/L;检出限为8. 6 ×10 - 9 mol/L。以稳态速率法测定了米氏常数(Km )和米氏速率(Vm ) ,确定其抑制类型为竞争性抑制。方法用于人血清样品中蛋白质的测定,操作简便,灵敏度高,选择性好,结果满意。



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TAG: 血清白蛋白过氧化物酶邻苯二酚紫辣根

 

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