失血性休克大鼠肝脏蛋白质的差异分析

摘要　应用蛋白质双向凝胶电泳(two2dimensional polyacrylamide gelelectrophoresis , 22DE) 技术,分析在急性重度失血性休克(refractoryhemorrhagic shock , RHS) 条件下,大鼠肝脏蛋白质组表达的差异.16 只雄性Wistar 大鼠随机分成正常对照组( sham hemorrhage shock , SHS) 和RHS 模型组,每组8只. 采用股动脉放血的方法制备模型,在规定时间内处死大鼠并分离肝脏,提取肝脏总蛋白质后进行22DE. 运用Image Master 2D Platinum v 510 凝胶图像分析软件对22DE 凝胶图像进行差异表达分析. 有意义的差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱进行肽质量指纹图谱分析,借助Swiss2prot 数据库进行蛋白质搜索和鉴定. SHS 组和RHS 组肝脏的22DE 图谱,分别平均识别到698±11 和700 ±13 个蛋白质点,SHS 组和RHS 组肝脏间平均匹配率达88 %～92 %. 共发现10 个差异有意义的蛋白质点,鉴定出了肿瘤抑制性抗原gp96、葡萄糖调节蛋白58 、过氧还蛋白Ⅰ、细胞色素b5 、谷胱甘肽转移酶、ATP 合酶β亚单位、二磷酸果糖酶B、三磷酸甘油醛脱氢酶等8 种蛋白质.结果表明,以22DE 技术得到重复性和分辨率都较好的22DE 图谱,并初步鉴定急性重度失血性休克后大鼠肝脏的差异表达蛋白质,为深入研究失血性休克的生理病理机制及寻找失血性休克预防和治疗的生物标志物提供了依据.