橡胶树死皮病胶乳C2乳清差异表达蛋白质的筛选与鉴定

摘要　橡胶树死皮病( tapp ing panel dryness, TPD)在世界各橡胶种植园普遍发生,给橡胶种植业带来严重的危害。为了更好地了解和阐明死皮病发生、发展的分子机制,应用双向凝胶电泳技术(22DE)比较橡胶树死皮株与健康株胶乳C2乳清蛋白质组表达的差异。采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离橡胶树死皮株与健康株C2乳清的总蛋白质,凝胶经考染显色后,用PDQuest7. 40图像分析软件进行比较分析,识别差异表达的蛋白质。这些点经过胶内酶切后进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALD I2TOF2MS)分析获取肽质指纹图谱( PMF) ,Mascot软件搜索SW ISS2PROT和NCB Inr数据库鉴定蛋白质。结果: (1)橡胶树死皮株与健康株C2乳清凝胶的平均蛋白质点数分别为1075 ±35和1134 ±27,其平均匹配的点数分别为982 ±38和1008 ±22,组内图像匹配率达91. 89%和88. 72%。(2)橡胶树死皮株与健康株C2乳清组间的平均匹配蛋白点数为970±25。利用MALD I2TOF2MS质谱技术对40个差异明显的蛋白点进行分析鉴定,通过查询数据库鉴定了27个蛋白质。建立了分辨率高且重复性较好的橡胶树死皮株与健康株胶乳C2乳清的双向凝胶电泳图谱,并应用质谱技术鉴定了其中表达差异的蛋白质点,这些差异表达的蛋白质可能参与了死皮发生和发展的过程。