DMSO 处理后中国仓鼠卵巢细胞的蛋白质组变化分析

上一篇 / 下一篇 2009-01-11 19:41:40/ 个人分类：蛋白质

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摘　要: 在培养基中添加二甲基亚砜(DMSO) 可使基因工程中国仓鼠卵巢细胞(CHO) 外源蛋白乙肝表面抗原(HBsAg) 的比生产速率提高4 倍以上. 为了进一步研究DMSO 的作用机理,采用双相凝胶电泳技术分离在培养基中添加1. 5 %的DMSO 后CHO 细胞的总蛋白,胶态考马斯亮蓝G- 250 染色,GS - 800 凝胶扫描仪获取凝胶图像,并用PDQUEST 软件分析,测得每张图谱平均斑点数量为1 852 ±123 ,以其中一块胶为参考胶进行4 块胶间的斑点匹配,其平均匹配的点数达1 326 ±100 ,平均匹配率为71. 6 %以上. 通过分析得到18 个蛋白质点在添加了DMSO 后表达量有明显变化(其中12 个蛋白表达量明显降低,6 个蛋白表达量明显增加. 用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测定其胶内酶解后的肽质指纹谱图和串级质谱图,用GPS 软件查询NCBI 数据库进行了鉴定. 鉴定结果表明,这些差异蛋白中一些是与细胞周期有关的蛋白,一些是与细胞能量代谢相关的蛋白,还有一些是与蛋白翻译后修饰有关的酶,这些结果进一步深化了对DMSO 提高CHO 细胞表达HBsAg 的机理的理解.

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