荧光素酶报告实验步骤钟鼎生物
2020.5.25
荧光素酶检测系统
，可用裂解液来温和而快速地提取真核细胞中的荧光素酶，用其底物来检测荧光素酶活性。检测步骤如下：
1. 加裂解缓冲液裂解转染的细胞。
2. 将上述裂解物转移入微孔板或者试管中（根据检测的需要选择所用器材类型）。
3. 加入含有所有酶反应成分（必须包括底物荧光素），使化学发光反应开始。
4. 使用荧光仪或者液闪计数仪检测所发射的荧光。
实验步骤：
注：该操作流程通常用来检测转染了萤火虫荧光素酶基因的真核细胞中荧光素酶表达的活性，不适用于对细菌荧光素酶进行检测。
1．实验第一天，消化并接种细胞（根据具体实验选择合适的细胞）于35mm细胞培养皿，置于5％co2、饱和湿度的37℃培养箱内培养过夜。
2．等细胞密度达到70％时用
luciferase报告基因质粒
、lacz的表达质粒及其它质粒（根据具体实验确定）共转染细胞（根据具体实验选择
转染方法
，如磷酸钙沉淀法......
......
荧光素酶的作用原理及应用
luciferase）。其中萤火虫荧光素酶作为报告基因反应目的基因表达的改变，肾荧光素酶作为内参基因，为实验提供统一基准线（减少内在变化因素如培养细胞的数目，细胞转染和裂解的效率对实验准确性的影响）。实验原理萤火虫荧光素酶在氧气
荧光素酶报告基因与绿色荧光蛋白（GFP）有什么区别
1。两者的结果检测方法不同。gfp绿色荧光蛋白，很直观，能够直接检到荧光，在普通的细胞培养条件下都能够观察到，对细胞的生命活动和其他并行的实验安排影响很小。荧光素酶报告基因使用起来比gfp多一个步骤，因为荧光素酶是个酶，不发荧光，发荧光的
荧光素酶的种类以及应用
（海肾）荧光素酶，最后是Firefly（萤火虫）荧光素酶。其他应用荧光素酶可被用做单报告基因在特定生物实验中研究某一生物学事件。因不同荧光素酶的发光光谱特性和底物都是不一样的，所以还可以将多个不同的荧光素酶组合使用，进行多重检测。多重检测更
如何使用多功能酶标仪检测双荧光素酶
检测基因的表达。但是报告基因实验中往往会受到各种实验条件的影响，例如培养细胞的数目和活力的差别、细胞转染和裂解的效率、以及加样操作过程中引起的变异。Dual-Luciferase双荧光素酶报告基因检测系统中含有在同一细胞中同时表达的两种荧光
荧光素酶报告基因与绿色荧光蛋白（GFP）有什么区别
只能先就标题的问题谈谈我的认识。后面的追问我了解得也不全面。1。两者的结果检测方法不同。gfp绿色荧光蛋白，很直观，能够直接检到荧光，在普通的细胞培养条件下都能够观察到，对细胞的生命活动和其他并行的实验安排影响很小。荧光素酶报告基因使用
荧光素酶基因标记肿瘤细胞的实验步骤
哺乳动物生物发光，一般是将Firefly luciferase基因（由554个氨基酸构成，约50KD）即荧光素酶基因整合到预期观察的细胞染色体DNA上以表达荧光素酶，培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株，当细胞分裂、转移、分化时
双萤光素酶报告基因检测
基因表达水平； 6) 数据分析，整理提交客户原始数据及实验报告。 注：为了实验严谨性，可加入靶基因3’UTR区microRNA预测结合区域的突变体作为对照，进一步说明问题。 需客户提供： ①靶基因名称 ②靶基因种属 ③调控因子相关信息 交付给客户： ①质粒及其构建报告 ②原始数据 ③双荧光素酶检测报告
双荧光素酶实验原理
双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光
荧光素酶的作用原理及应用
luciferase）。其中萤火虫荧光素酶作为报告基因反应目的基因表达的改变，肾荧光素酶作为内参基因，为实验提供统一基准线（减少内在变化因素如培养细胞的数目，细胞转染和裂解的效率对实验准确性的影响）。实验原理萤火虫荧光素酶在氧气
。 三、荧光素酶报告基因检测服务说明 1.客户提供：含有荧光素酶报告基因的重组质粒（如需公司提供请说明）。2.服务周期：3-4周3.若另有疑问请致电本公司咨询，我们将竭诚为您服务。 四、荧光素酶报告基因检测质量承诺 1.权威的鉴定报告；2.原始的实验数据；3.详细的实验步骤。
，提高一倍的实验效率◆专利喷射式分注器，准确加样的同时达到混合样品的作用 ■双荧光素酶报告基因系统的实验步骤1.构建含promotor/TRE序列的萤火虫荧光素酶报告基因载体；2.检测阳性菌落，测序；3.
。二、实验步骤（动物）：（1） 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。（2） 设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒中。（3
实验技术服务-荧光素酶报告基因 概述 Luciferase报告基因系统是以荧光素为底物来检测萤火虫荧光素酶活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化