2021.4.26
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。
低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。
保藏方法大致可分为以下几种:
1.传代培养保藏法
又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4—6℃冰箱内保存。
2.液体石蜡覆盖保藏法
是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
3.载体保藏法
是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4.寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培养基上生......
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后对菌株纯度、菌落形态(在选择培养基上的典型菌落)、生化特性(如氧化酶试验、三糖铁试验等)、表型分析(生化鉴定)进行核查并记录,以保证菌种使用的有效性。菌种保藏方法可依据标准SN/T2660-2010《食品微生物实验室菌种保藏方法》进行保存
以上保藏设备中。• 菌种入库和出库应记录入档。• 重要菌种应异地保存备份。3、菌种保存方法1)传代培养法:复苏后的第一代放于4℃冰箱或室温保存,定期传代培养。保藏时间依微生物种类而定。如,芽孢、霉菌、酵母菌保存6个月转一次,普通细菌1个月转
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顶端1cm为准(图Ⅶ-12),使菌种与空气隔绝。 (4)将试管直立,置低温或室温下保存(有的微生物在室温下比冰箱中保存的时间还要长)。 此法实用而效果好。霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死,酵母菌可保藏1—2年,一般无芽孢细菌也可
(0.2mmHg).于真空状态下,以煤气喷灯的细火焰在安瓿管颈中央进行封口.封口以后,保存于冰箱或室温暗处. 此法为菌种保藏方法中最有效的方法之一,对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用,即使对一些很难保存的致病菌,如
实验室菌种保藏方法》进行保存。建议实验室购买-80℃超低温冰箱,选择甘油保存法,甘油保存方法操作方便,保存时间较长。菌株使用过程中应在生物安全柜中进行,遵循无菌操作以防菌种污染。使用完的菌种应按生物安全要求,在121℃高压灭菌30min,并做好菌种销毁记录。 实验室菌株管理是小事,然而却是重要的事。他直接影响着实验结果的准确性,不容忽视哦!
将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌充分生长后,棉塞部分用油纸包扎好,移至2-8℃的冰箱中保藏. 保藏时间依微生物的种类而有不同,霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2-4个月,移种一次.酵母菌两个月,移种一次.细菌最好每月
Ⅶ-12),使菌种与空气隔绝。 (4)将试管直立,置低温或室温下保存(有的微生物在室温下比冰箱中保存的时间还要长)。 此法实用而效果好。霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死,酵母菌可保藏1—2年,一般无芽孢细菌也可保藏1年左右,甚至用一般
℃冰箱中。 使用时的注意事项• 被保存的菌种要求是经过纯化后培养 18-24h 内的新鲜菌种(细菌18-24h,酵母菌需3 天,形成孢子的微生物保存孢子,而放线菌和丝状真菌需培养7 天后保存),不宜使用老化或未经鉴定的菌种。• 菌种
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