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wb转膜仪器

发布时间:2019-04-19

b. 转膜方式分为半干转移和湿转移两种,半干式转膜速度比较快,而湿式转膜不会因为膜的干燥而失败,因此成功率高并特别适合分子量大于 100  kda 的蛋白。两种转膜方式都是膜紧贴凝胶,位于两层吸收材料之间,固体夹板夹在外面以保证膜和凝胶的紧密接触。

c. 湿式转膜中膜和凝胶的三明治结构位于滤纸和海绵体之间(海绵/纸/胶/膜/纸/海绵),全部紧密排列,特别是胶/膜之间不能留有气泡。整个三明治结构浸泡在转移缓冲液中,然后施加电场。带负电荷的蛋白向阳极移动。但膜阻挡了它们,并与其进行结合,从而阻止了它们的继续移动。凝胶一般在  100v 条件下运行 1~2 小时,但时间和电压需要优化,我们推荐根据厂家的说明进行操作。

d. 标准的湿转缓冲液和电泳缓冲液一样,为不含 sds 的 1x tris-gly 缓冲液,加入终浓度 20% 甲醇。如果转膜的蛋白分子量大于 80 kda,则推荐加入 sd......

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