当前位置:首页>仪器其他>pvdf膜仪器其他

pvdf膜wb用转膜液

发表于: 2014-1-24 22:28    作者: xue258    来源: 分析测试百科网

.tip{font-weight:bold;margin:20px 0px;}

查看完整版本请点击这里:

【求助】转完膜后pvdf膜是直接放到抗体内还是用pbst洗几遍?

请教:转完膜后pvdf膜是直接放到抗体内还是用pbst洗几遍?

今天看到生物秀上说要用tbst洗三遍 10min/次,我都是在pbst内洗一下就放到抗体里了(抗体使用封闭液配的)。

查看完整版本请点击这里:

【求助】转完膜后pvdf膜是直接放到抗体内还是用pbst洗几遍?

我也来说两句

查看全部回复

最新回复

gogo

(2014-1-24 22:28:31)

楼主可能在程序上稍有些混,

转膜完毕后应先进行封闭,用5%的脱脂牛奶即可,一般1小时即可,

然后才是加一抗,一抗孵育好之后,下一步就是一抗的洗脱,即洗脱非特异性结合......

......

pvdf膜wb用转膜液相关资料

【讨论帖】western blot问题解答 - 经验共享 - 分析测试百科

谢谢老师 前面的回答。PVDF膜通常用甲醇活化,可不可以用乙醇或其他试剂代替。转膜缓冲液中的甲醇可不...

【求助】转完膜后PVDF膜是直接放到抗体内还是用PBST洗几遍...

在所有这些过程中,PVDF膜应保持湿润,但不存在转膜后洗膜的问题,希望对楼主有所帮助。

【求助】转膜问题,急! - 经验共享 - 分析测试百科网 - 分...

今天将pvdf膜在甲醇中浸泡20分中,然后放入转膜缓冲液中浸泡20分钟,再进行转膜,结果膜上可以看到maker,但是用丽春红染膜,8-16kd间未见任何蛋白条带,而同时用NC膜转的30-50kd之...

【求助】PVDF转膜 - 经验共享 - 分析测试百科

PVDF转膜用丽春红染色后,条带不能立即显示,大概等10分钟后,条带很浅,但是等膜干了后条带全没有...

【求助】WB实验中膜的正反面 - 经验共享 - 分析测试百科

在Western Blot实验中,转膜后,PVDF或者NC膜的正面应该就是靠正极那面吧?也就是靠胶的那面是反面?...

【求助】Western-Blotting全湿转膜 - 经验共享 - 分析测试...

我用的是amershem公司的Mini电泳槽,做WB用的是全湿法 缓冲液是25 mM Tris, 192 mM 甘氨酸, 20% (v/v)甲醇 (pH 8.3); 胶大概是8cm x 7.3 cm,厚度0.75mm。 参数:恒流200mA,2 ho...

【求助】转膜是否转过? - 经验共享 - 分析测试百科

如果用pvdf膜,依楼主的大分子量蛋白一般不会转穿,当然电压和电流也有影响,同时电转液的ph值也有...

western blot转膜是怎么做的 - 分析行业新闻

蛋白免疫印迹( Western Blot) 是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上。目前主流方法是电转印法,分为湿式转印与半干转印...

【求助】总是转膜不干净! - 经验共享 - 分析测试百科网 - ...

应用液:甲醇200ml+10X转膜液100ml+双蒸水700ml 我们是恒流80mA,电压就能达到70V,第一次可能达到80V。我的蛋白78KD的转1.5h -2h 就可以了。多转一会儿也没事,PVDF膜是很难转过...

春眠不觉晓,WB 知多少(一) - 分析行业新闻

在进行 WB 电泳时,是否需要加入 Marker?能够在最后的膜上曝光出来吗? Amersham 预染分子量彩虹 Marker(全分子量 12 KD - 225KD,货号:RPN800E,火热促销 ing)可...

pvdf膜-仪器信息