2019.12.24
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不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪是在电泳体系中采用两种以上的缓冲液成分、ph和凝胶孔径,其中不连续盘状凝胶电泳zui为常用。在不连续盘状凝胶电泳中存在样品的浓缩效应、凝胶的分子筛效应和电荷效应三大效应,由于这三种物理效应,使样品分离效果好,分辨率高。
一、浓缩效应:
1、凝胶层的不连续性:
(1)样品胶:为大孔胶,采用光聚合法制备。样品预先加在其中,起防止对流的作用,避免样品跑到上面的缓冲液中。目前电泳一般不制作此胶。
(2)浓缩胶:为大孔胶,采用光聚合法制备。起防止对流的作用,样品在其中浓缩,并按其迁移率递减的顺序逐渐在其与分离胶的界面处浓缩成薄层。
(3)分离胶:为小孔胶,采用化学聚合法制备。样品在其中进行电泳和分子筛分离,起防止对流的作用。蛋白质分子在大孔凝胶中受到的阻力小,移动速度快。进入小孔凝胶时受到的阻力大,移动速度减慢。由于凝胶层的不连续性,在......
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