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首都医大:miRNA调控大型哺乳动物牙齿发育

2013.1.17

  MicroRNA(miRNA)在啮齿类动物牙齿发育过程中扮演着重要的调控角色,但我们对其在大型哺乳类动物的牙齿发育中的作用知之甚少。现在,首都医科大学副校长王松灵教授领衔的团队利用Seq-Array™(芯片与二代测序相结合策略)技术方法鉴定出小型猪在下乳牙发育过程中的特定miRNA组和表达谱(由联川生物完成Seq-Array™技术服务),此项研究也为探索小型猪牙齿发育的分子机制提供了重要信息*。该研究成果发表在2012年12月刊PLoS ONE上。

  王松灵教授团队首先使用二代深度测序技术大规模筛查小型猪(Sus scrofa)在下乳牙发育过程中的miRNA表达谱,鉴别出637条miRNA序列。深度测序获取的结果,可以广泛地覆盖不同发育时期和不同来源样品中的全部miRNA,而不需要任何已知的序列信息。然而,由于样品处理相对的高成本与低通量特性,如果用测序进行重复性的验证和(或是)表达谱分析将会发现花费很长时间,而且价格昂贵。

  代替重复测序,使用芯片可以进行高通量的表达谱分析。芯片上可以涵盖完整的测序发现的序列信息,系统的分析表达谱,并进行差异表达分析。芯片具有快速、可重复,并且性价比高的特点。

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  研究人员将测序发现的候选miRNA,和105条已知的Sus scrofamiRNA定制合成在miRNA芯片上用于分析牙齿发育的四个时期:牙芽期,帽形期,钟形早期,钟形晚期的miRNA表达谱。芯片分析结果显示在四个发育时期有166个miRNA存在差异表达。生物信息学分析鉴别出18个关键miRNA,包括 let-7f,miR-128, miR-200b, 和miR-200c,在牙齿发育过程中也许扮演着关键角色。

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  *Li A, Song T, Wang F, Liu D, Fan Z, Zhang C, He J, Wang S. (2012) MicroRNAome and Expression Profile of Developing Tooth Germ in Miniature Pigs. PLoS One 7(12):e52256.

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