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生物呕吐毒素荧光定量检测试纸条性能评估验证...(二)

2020.4.28

取10个无污染(阴性)小麦样品和10个无污染(阴性)玉米样品,用上海飞测生物呕吐毒素荧光定量检测试纸条每个样品检测3次,检测限(LOD)为测定平均值加3倍标准偏差,定量限(LOQ)为测定平均值加10倍标准偏差。测试结果表明,DON的LOD为25μg/kg,LOQ为82μg/kg。  

2.2准确性和重复性分析  

在用国标法测定为0的空白样品中分别添加呕吐毒素总量为100,250,500,1000,2000,5000μg/kg,然后按照呕吐毒素荧光定量检测试纸条的检测方法进行检测。检测结果见表1。 

表1  不同样本检测的准确性和重复性

从表1可以看出,上海飞测生物科技有限公司所生产的呕吐毒素荧光定量检测试纸条测试不同粮食谷物中呕吐毒素的添加回收率在83.51%~113.84%,3次重复的变异系数在14.75%以内。 

2.3与色谱方法的对比试验结果  

大米、小麦、玉米、面粉、麸皮、喷浆玉米、大豆、豆粕各1份共24个样本,先采用国标液相色谱法进行测定,再使用上海飞测生物科技有限公司所生产的呕吐毒素荧光定量检测试纸条进行测定,各测试3个平行样。检测结果如下:  

表2  与液相色谱法结果比对(μg/kg)

表2表明,在不同的粮食谷物饲料中,上海飞测生物科技有限公司所生产的呕吐毒素荧光定量检测试纸条与液相色谱法的符合率为102.00%~110.85%,3次重复测定的的CV值在8.84%以内。 

2.4方法特异性  

选择 DON结构类似物和其他5种真菌毒素的标准品在阴性玉米中进行添加,添加的浓度为1000 μg/kg,然后用飞测生物呕吐毒素荧光定量检测试纸条进行测试,每个样品测3次取平均值;结果显示与赭曲霉毒素A,伏马菌素B1,黄曲霉毒素B1、T-2毒素、玉米赤霉烯酮交叉反应率均<5%,与其代谢物、结构类似物有一定的交叉反应(<20%)。

实验结果表明,呕吐毒素胶体金试剂条对伏马毒素、赭曲霉毒素、黄曲霉毒素、玉米赤霉毒素几乎无交叉反应,其方法特异性可以能满足检测要求。

3结论  

本实验采用上海飞测生物科技有限公司所生产的呕吐毒素荧光定量检测试纸条对不同的粮食谷物饲料样本进行测试,该产品的检出限为25μg/kg,最低定量限为82μg/kg,线性范围为100-5000μg/kg,线性范围内的添加回收率为83.51%~113.84%,同一个样本的检测3个样本的CV<14.75%,与其他真菌毒素的交叉反应率均小于5%,与其代谢物的交叉反应率在20%以内。其准确性和可靠性均可以满足欧盟和我国对呕吐毒素的分析标准的技术要求。

该方法具有简便快速、准确可靠、重复性好等特点,可用于不同粮食谷物饲料中呕吐毒素的快速定量检测分析。


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