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荧光定量PCR实验中的内参基因

2022.10.11

通常它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测基因的表达水平变化时常用它来做参照物。内参基因通常是持家基因(house-keeping gene)因为其表达水平受环境因素影响较小,而且在个体各个生长阶段的几乎全部组织中持续表达变化很小。常用的内参基因包括GAPDH、β-actin(BETA-actin)、18sRNA、B2M、HPRT和TBP等。

内参基因的优点是与样品中的靶基因经历完全相同的处理程序,可以监控采样,运输,核酸提取和扩增的全部过程。缺点是不同物种,不同生理状态下,不同组织中的内参基因存在一定的差异。如果样品类型是口腔液,咽拭子等样品,内参基因的量很低可能导致实验不成立。如果检测的是环境样品则内参基因可能完全失效。

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