检验人，请不要忽视粪便隐血试验中的“钩状效应”
粪便隐血试验（FOBT试验）是临床检验科常用的检测消化道出血的一种方法，多用于检测肉眼观察不到的消化道出血。对消化道肿瘤早期有着良好的普查作用，提高消化道癌症的检出率。
试验原理:（以两种常用的检测方法叙述）
免疫胶体金法：
应用胶体金免疫检测技术，用免疫学方法（双抗体夹心法）检测人粪便样本中出现的人血红蛋白（Hb）。它的反应线（T）包被有抗人血红蛋白单克隆抗体，质控线（C）包被有羊抗鼠IgG抗体，在检测卡的加样端的（G）区固定了胶体金颗粒标记的抗人血红蛋白单克隆抗体(金标抗体)。当病人样本中存在人血红蛋白（Hb）抗原时，先与金标抗体反应，形成抗原-金标抗体复合物，依靠毛细作用在纤维膜上层析，运行至反应线时，遇到包被抗体形成了 抗体-抗原-金标抗体复合物，并在检测区上出现红色色带，结果为阳性，如果样本中没有血红蛋白，检测区就没有红色线出现，结果为阴性（当然也有部分特殊情况，在以下的病例中会讲到）。由于金标抗体相对于抗原是过量的,所以在检测样本时,质控线处的羊抗鼠IgG抗体能够与金标抗体结合,出现红色色带，表示检测卡工作正常，若没有出现则试纸条失效。
化学法：
血红蛋白具有过氧化物酶活性，可使氧化物分解释放出氧原子，氧原子氧化四甲基联苯胺指示剂，使指示剂颜色出现变化。当样本中含有一定量的人Hb时，指示剂浸染的试纸颜色会从橙色变成黄绿色或深绿色，非常高浓度的Hb会使颜色继续变成深蓝色。
性能指标：
最低检测量为免疫法，为0.2μg/ml；化学法是2μg/ml，线性范围划分为小于2μg/ml、20—2002μg/ml、200—20002μg/ml，大于20002μg/ml五个检测区间。
本试验注意事项:
1、在挑取粪便时，应从新鲜粪便的内部取材，这样经过上消化道渗出的血液才可能被检测到，并且防止了从直肠、肛门痔疮或者肛裂等疾病引起出血而造成假阳性。
2、试验前3天内，不应食用动物的血、肉、肝脏（消化后含大量血红蛋白），服用铁剂，食用含过氧化物酶的叶绿素新鲜蔬菜等，以免造成结果假阳性；但如果粪便放置过久或便秘后再送检，可能会因为Hb被细菌降解而变成假阴性，以及服用维生素C等还原作用药物都会导致试验假阴性。
3、还应注意抗原、抗体比例不适造成的“钩状效应”，如当消化道出血过多时，即所要检测的抗原（Hb过多）过剩，导致结果假阴性。
临床意义:
粪便隐血试验主要用于消化道出血、消化道恶性肿瘤、胃溃疡、药物导致的胃粘膜出血、应激导致的胃肠道急性出血等疾病。 对消化道肿瘤早期有着良好的普查作用，提高消化道癌症的检出率。
特殊病例讨论：
中秋节前的一个晚上，我上夜班，一个中年妇女手捂着肚子，来检查粪便常规+隐血。当时我猜测她可能是急性胃肠炎。她送过来的粪便我一看，基本上是液状，然后捎带一点血丝。由于当时比较忙，晚上病人比较多。我就先做了隐血，然后忙其他的去了。十几分钟过去了，病人在问报告，我就看了一下，隐血是阴性的，也就没有多注意，显微镜就看了一下，没有看到红细胞，就发报告了。
等我忙完了以后，停下来，才想起来那份标本有红色血丝，怎么隐血是阴性的？我就纳闷了，翻找垃圾桶后，找到了刚刚那个隐血试剂条，确实只有一条质控线。
好奇的我将标本进行了化学半定量检测，结果却是深深墨绿色！这结果相当于隐血半定量3+。忽然间，我意识到我做错了什么，还好标本还在，用生理盐水稀释一下，再做一次隐血试验，结果强阳性。我再在显微镜下仔细找了找，果真是有红细胞存在。我猜测，可能是由于Hb过多导致假阴性，于是我立即联系了医生，并向医生道歉，才没有让错误继续下去。
所以，当我们在工作时，一定要细心，宁可慢也不要出错！在做大便隐血时，对于一些有疑问的标本，我们要主动将胶体金法和化学半定量的方法结合起来进行检测，去验证结果，不要忽略任何细节！为医院塑造一个安全、可靠的检验科。
