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病原微生物的检测——杂菌总数的测定（二）
关键词：杂菌总数测定 [size=10.5pt]生物成分分析标准物质 [size=10.5pt]食品检测标准物质 [size=10.5pt]环境检测标准样品病原微生物的检测——杂菌总数的测定（二）
4．菌落计数方法
作平皿菌数计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。记下各皿的菌落后，求出同一稀释度的各皿平均菌落数。
5．菌落计数的报告
①选取菌落数在30～300之间的平皿作为细菌总数测定的标准。一千稀释度使用两个平皿，应利用两个平皿的平均值，其中一个平皿有较大片状菌落生长时，则不宜采用。而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的菌落数。若片状菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，则可计算半个平皿后乘以2，而代表平皿菌落数。
②报告所选择的稀释度：规定选择的平均菌落数在30～300之间的稀释度，以平皿菌落数乘以稀释倍数，所得的菌落总数作为报告。若有两个稀释度其菌落数均在30～300之间，则以两者之比来决定，其比值小于2应报告平均数。
注：①应选择平均菌落数在30～300之间的稀释度乘以稀释倍数报告之。例如，表中例1应选1：100稀释度，计数菌落在162×100等于16 200，报告16 000或1．6×104。
②若有两个稀释度，其生长之菌落数均在30～300之间，则应根据二者的比值决定。若比值小于2，报告平均数；若比值大于2，则报告其中较小的数字。表中例2，100倍和1000倍稀释的检样均在30～300之间，而比值小于2，应报告(29500+46000)/2=37750，报告38 000或3．8×104，例3中比值大于2，应报告27 000或2．7×104。
③若所有平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。如表中例4所有平均菌落数均大于300，其最高稀释倍数是513，按最高稀释倍数乘1000报告，即为513 000，报告为510000或5．1×105。
④若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之，如表中例5，三种稀释倍数均小于30，故按最低稀释数10倍报告，即270或2．7×l02报告。
⑤若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，其中一部分大于300，一部分小于30，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告。如表中例6，10倍、l00倍大于300，1 000倍小于30，而以100倍稀释的菌落305最接近300，故按31 000或3．1×104报告。
6．说明
①杂菌数的检查应在无菌操作条件下进行，每周熏蒸无菌室一次，每立方米用工业高锰酸钾l0 g加入甲醛15 mL，自混合后关闭门窗24 h以上，次日启用时如有甲醛刺鼻气味，可先用氨水吸收半小时左右。
②使用前配制3％～5％漂白粉溶液，用于擦洗地板、墙壁及无菌台，并可喷淋空间。
③检样瓶用0．1％新洁尔灭溶液或用75％酒精擦净，并用石炭酸纱布覆盖瓶口，用灭过菌的开瓶器打开瓶盖备用。
④进无菌室须穿灭过菌的工作服、帽子及拖鞋。用防潮纸包好衣帽，高压灭菌。
⑤在操作过程中，不得说话和起动。
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