只养雌鳗鱼又不遗留激素？质谱分析专家出了一招
分析测试百科网讯 当我们从超市里买来一尾又肥又大的鳗鱼时，不会想象到，年轻时，它其实游动在入海口，并且连性别都没有确定。现代科学技术确保它在上餐桌前经历了一系列复杂的过程。
商业养殖鳗鱼，首先要从入海口处捞出性别还没有确定的“年轻的鳗鱼”（young eels），又叫“玻璃鳗鱼”（glass eels）或鳗线，然后在人工养殖池中养大。因为人工养殖环境中，鳗鱼的密度过大，使得这些玻璃鳗鱼中的大部分会发展成为雄性。
鳗鱼
但是，雌性鳗鱼的个头能长得更大，更具商业价值。于是，养殖者会加入含有雌激素，如17β-雌二醇的饲料，以确保其雌性化。但是，我们还要注意，这些加入的雌激素只需要保证鳗鱼成为雌性，而不是遗留下来，和鳗鱼一起送上餐桌。所以养殖鳗鱼中的雌激素水平必须准确监测，以确保当鳗鱼进入人类食物链时，没有多余的激素存在。
类固醇激素一般通过免疫测定，LC-MS或GC-MS检测（后一种检测方法通常需要衍生化）。加拿大科学家决定把LC-MS/MS与差示离子迁移谱（DMS）结合起来使用。后一种技术发生在HPLC和MS系统之间。这种技术使用ESI源产生离子，然后根据离子在电场中不同的迁移率将它们分离。
LC-MS/MS与DMS组合用于类固醇激素检测
研究人员检测了美国鳗鱼样品中的三种类固醇激素：添加到饲料中的17β-雌二醇，以及相关化合物雌酮和雌三醇。这三种化合物在一定程度上天然存在于鱼类中。在不同时间点采集鱼进行肌肉组织取样，并捕获野生雌性鳗鱼进行抽样。将肌肉样品匀浆，然后用乙腈在超声处理下萃取。
使用装有Phenomenex Luna3μmC18柱的赛默飞Ultimate 3000 RSLCnano色谱仪和含有0.05％氢氧化铵的乙腈和水梯度洗脱进行HPLC分析。将SCIEX SelexION源用于差示离子迁移率（DMS），以异丙醇作为改性剂（即为了提高选择性而引入到离子迁移源中的挥发性物质）。在这种情况下，为了通过DMS分离类固醇离子，需要使用改性剂和仔细调整DMS参数。最后，使用SCIEX QTRAP™ 5500 LC/MS/MS 系统进行MS/MS。优化选择性反应监测以给出感兴趣的三种类固醇的特异性转换。
总的来说，LC-MS/MS与DMS组合可得到很好的分离效果，但应注意的是，三种主要的化合物可以在最佳条件下通过HPLC单独分离。打开DMS有助于提供更清晰的光谱。该系统用于测量在补充剂从其饮食中撤出后鳗肌中17β-雌二醇的下降。发现有关类固醇在撤离后第5天达到了背景水平，与未经处理的养殖鳗鱼相同。最终水平比野生雌鱼发现的水平要低一些。在最后一次喂食17β-雌二醇之后，仅观察到雌激素达到较低水平，而没有检测到雌三醇。
DMS增强了LC-MS/MS，但值得吗？
LC-MS/MS与DMS的组合可成功应用于鳗鱼激素的监测。结果清楚地表明，加入17β-雌二醇的雌性化鳗鱼没有产生任何长期积累的雌激素。然而，尽管DMS有助于提供更清晰的光谱，但仍未实现适当的分离。虽然这种技术无疑可显著提高一些复杂分析的性能，但目前尚不清楚一些实验室是否会考虑将DMS系统的额外费用用于类固醇分析。
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