Agela Venusil AA HPLC法测定“皮革奶”中羟脯氨酸

2011-2-18 12:00 来源: 博纳艾杰尔科技
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  方法摘要:

  Venusil AA 氨基酸分析的原理为目前广泛使用的PITC(异硫氰酸苯酯)衍生法。经过简化后的衍生方法有很多优点:方便、快速;衍生物单一、稳定,-20℃可贮存数月;采用Venusil AA 柱分析时间短;结果准确;试剂、副产物、溶剂等多种干扰因素可通过快速萃取去除;紫外检测(254nm)灵敏度高。

  样品:

  取某品牌牛奶0.5g,按照博纳艾杰尔氨基酸分析方法包进行水解衍生,并取混合氨基酸标准溶液(准确量取氨基酸标准溶液1.0 mL,置于5mL容量瓶中,加0.1mol/L盐酸溶液定容至刻度)加内标正亮氨酸,然后进行衍生。(异硫氰酸苯酯为衍生剂)

  色谱柱:Agela Venusil AA,4.6×250mm,5µm,100Å(订货号:VA952505-K)

  流动相:A:称取15.2g无水醋酸钠,加水1850mL,溶解后用冰醋酸调pH至6.5,然后加乙腈140mL,混匀,用0.45µm滤膜过滤。

  B:80%(V/V)乙腈溶液

时间 流动相A
0 0
2 0
15 10
25 30
33 45
33.1 100
39 100
39.1 0
45 0

  流速:1.0mL/min

  进样体积:10μL

  温度:40℃

  波长:254nm

Agela Venusil AA HPLC法测定牛奶中羟脯氨酸混和标准品图谱 (6.50min为羟脯氨酸)

Agela Venusil AA HPLC法测定牛奶中羟脯氨酸图谱(6.51min为羟脯氨酸)