实验方法原理高效液相色谱法是一种重要的色谱分离技术。根据所用固定相和分离机理的不同,一般将高效液相色谱分为分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱和空间排斥色谱等。在分配色谱中,组分在色谱柱上的保留程度取决于它们在固定相和流动相之间的分配系数K:为组分在固定相中的浓度与组分在流动相中浓度之比。显然,K值越大,组分在固定相上的保留时间越长,固定相与流动相之间的极性差值也越大。...
LogP* — 其中P为化合物在正辛醇和水中的分配系数,表中值为ChemAxon软件计算获得。结果和讨论对于药物卡铂,其中的3个组分卡铂、顺铂和二碘二胺铂都是极性很强的化合物,如表1所示,其logP值在0-1之间;因此,采用反相LC分析时,化合物保留很弱,需要用到极高比例水相洗脱,对柱寿命以及方法的耐受性上会带来一定问题。...
然而,由于长时间正相硅胶的强大的极性作用,经常会和样品形成死吸附,影响分离效果,科学家在硅胶是基础上进行了修饰,将C碳链连接到硅胶的羟基上使其极性降低,具有了脂溶性的特质,同时由于固定相基质的变化,之前在正相当中所使用的的溶剂变得不可用,需要使用水相和有机相混合体系进行洗脱,由于各类化合物在水相和有机相之间都有相应的分配系数,样品的分配系数不同,洗脱下来的速度就会形成差异,最终达到分离的目的。...
四、色谱分离原理高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。1.液固色谱法 使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或氧化铝,粒度5~10μm。...
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