小鼠神经细胞蛋白质的SDS2PAGE 聚丙烯酰胺电泳及免疫印记鉴定方法的建立

摘　要:目的　建立一套组合的磷蛋白分析法检测小鼠神经细胞中参与信号转导的蛋白激酶和信号分子。方法　培养新生乳小鼠神经细胞,提取蛋白质,并进行SDS2PAGE 凝胶电泳,当电泳结束后利用半干式不连续转移缓冲系统将凝胶上的蛋白质转移到PVDF 支持膜上,结合免疫印迹和曝光自显影,即得到了小鼠神经细胞中磷蛋白分子(MEK2) 的免疫印迹图谱。结果　通过上述方法成功地获得了小鼠神经细胞磷蛋白组中磷蛋白分子(MEK2) 的免疫印迹图谱。结论　利用此组合方法可以检测小鼠神经细胞中参与信号转导的蛋白激酶或信号分子[1 ] 。实验证明本法操作简单,无放射性污染,灵敏度高、特异性强,经济适用,行之有效。