蛋白质印迹(Western Blot)是将电泳分离的蛋白质组分从凝胶转移至固相支持体上，以特异性抗体作为探针检测目的蛋白的一种生化检测技术。Western Blot常用于鉴定某一蛋白，并能对其进行定性和半定量分析，具有分辨率高、特异性强和灵敏度高等优点，是基因表达和蛋白质研究中常用的经典技术。

瑞晶生物为您提供Western Blot一站式解决方案，您只需准备好样品，其余全部由我们来为您完成。实验中所用试剂全部为进口名牌产品，确保为您提供精确的检测数据，获得生物学相关的结果。

主要服务内容包括：

1. 总蛋白提取：

（1）组织样品：取500mg新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml总蛋白抽提试剂（或核蛋白抽提试剂、膜蛋白抽提试剂），匀浆后抽提总蛋白（或核蛋白、膜蛋白）。

（2）细胞样品：取1×107个细胞，PBS清洗三次，加1ml总蛋白抽提试剂（或核蛋白抽提试剂、膜蛋白抽提试剂），裂解细胞并抽提总蛋白（或核蛋白、膜蛋白）。

2. 蛋白质定量：

按BCA法蛋白质定量试剂盒说明书操作，测定样品浓度。

3. 电泳(SDS-PAGE)：

将制备好的总蛋白液和蛋白质分子量标准分别上样，SDS-PAGE分离蛋白质。

4. 转膜：

冰浴条件下，使用湿转法将蛋白质由凝胶转移至PVDF膜上，电压及转膜时间根据蛋白质大小不同而有所变化。

5. 膜的封闭和抗体孵育：

（1）室温下将膜置于5％BSA溶液中孵育1小时，以封闭膜上的非特异结合。

（2）将封闭后的膜加入经适当稀释的一抗溶液中，室温孵育1.5小时，使抗原抗体充分结合。

（3）加入经适当稀释的酶标二抗溶液，室温孵育1小时。

6. 结果检测：

膜与发光底物孵育后，经X光胶片曝光、显影。胶片扫描后，使用专业图像分析软件将每条特异性条带的灰度值数字化。

7. 数据分析：

统计目的蛋白灰度值与内参蛋白灰度值的比值，得到目的蛋白的相对表达量及变化趋势。

8. 实验报告：

（1）实验步骤

（2）数据结果及相关图表

您需提供：

（1）一抗(以发表文献中应用过的一抗为佳)。

（2）新鲜的组织或细胞样本，干冰保存。

（3）相关背景资料。

收费标准及实验周期：

1500元/膜，每张膜可做8个样品。

实验周期一般为2周。

经典案例：

有机阴离子转运蛋白1（OAT1）具有转运尿酸的功能。上图为不同药物处理后大鼠肾组织中的表达情况。

蛋白质印记信息由上海瑞晶生物科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于蛋白质印记报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途