400-6699-117转1000
您好,欢迎您查看分析测试百科网,请问有什么帮助您的?
参考报价: | 面议 | 型号: | 暂无 |
品牌: | 暂无 | 产地: | 暂无 |
关注度: | 441 | 信息完整度: | |
样本: | 典型用户: | 暂无 |
400-6699-117转1000
重亚硫酸盐的测序法实验流程(BSP)
原理:结合重亚硫酸盐的测序法是一种灵敏的能直接检测分析基因组DNA甲基化模式的方法。重亚硫酸盐处理后,用针对改变后的DNA序列设计特异性引物并进行聚合酶链式反应(PCR)。 PCR产物中原先非甲基化的胞嘧***位点被胸腺嘧***所替代,而甲基化的胞嘧***位点保持不变。PCR产物克隆后进行测序。通过这个方法能得到特定位点在各个基因组DNA分子中的甲基化状态。
特点:
1、特异性高,它能够提供特异性很高的分析结果,这是所有其他研究甲基化的分析方法所不能比拟的;
2、灵敏度高,可以用于分析少于100个细胞的检测样品。用微量的基因组DNA进行分析就能得到各个DNA分子精确的甲基化位点分布图。
重亚硫酸盐测序法技术实验流程
A. DNA制备
用DNA抽提试剂盒(Promega, cat. no. A1125)抽提组织,细胞培养物,石蜡包埋组织切片样品中的基因组DNA。
B.重亚硫酸盐处理
C. DNA纯化
用Wizard DNA clean?up kit (Promega, cat. no. A7280)纯化重亚硫酸盐处理后的DNA样品。
D. PCR扩增
E. PCR产物琼脂糖电泳后回收纯化
F. PCR产物连接到pMD19?T (Takara) 载体中克隆及测序。
G.用分析软件对各样本测序结果进行甲基化程度分析
DNA甲基化检测--重亚硫酸盐的测序法(Bisulfite Genomic Sequence,BSP)信息由上海英拜生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于DNA甲基化检测--重亚硫酸盐的测序法(Bisulfite Genomic Sequence,BSP)报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。
注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途