DNA甲基化检测技术服务—BSP法

DNA甲基化是一种表观遗传修饰，它是由DNA甲基转移酶（DNA methyl-transferase, DNMT）催化S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine, SAM)作为甲基供体，将胞嘧***转变为5-甲基胞嘧***（mC）的一种反应，在真核生物DNA中，5-甲基胞嘧***是唯一存在的化学性修饰碱基。DNA甲基化是表观遗传修饰的主要方式，能在不改变DNA序列的前提下，改变遗传表现。一般说来，DNA的甲基化会抑制基因的表达。DNA的甲基化对维持染色体的结构、X染色体的失活、基因印记和肿瘤的发生发展都起着非常重要的作用。
   BSP法原理：用亚硫酸氢盐处理基因组DNA，未发生甲基化的胞嘧***被转化为尿嘧***，而甲基化的胞嘧***不变。随后设计BSP引物进行PCR，在扩增过程中尿嘧***全部转化为胸腺嘧***，zei后对PCR产物进行测序就可以判断CpG位点是否发生甲基化称为BSP-直接测序方法。如将PCR产物克隆至载体后进行测序，可以提高测序成功率，这种方法称为BSP-克隆测序法。

服务内容
1. 基因组DNA的Bisulfite转化。
2. DNA甲基化检测——基于BSP（Bisulfite sequencing PCR）法。
3.本公司所用试剂全为进口试剂，实验全程质量保证。

样品要求
　　　细胞（≥10⁶ 个）、组织（≥300mg）、血液（≥1ml）、血清（≥1.5ml）等样品材料，基因组DNA（体积≥50μl，浓度≥50 ng/μl）。
 
终产品
BSP-直接测序方法：Bisulfite处理的基因组DNA；测序峰图及实验报告。
BSP-克隆测序方法：Bisulfite处理的基因组DNA；阳性克隆质粒；测序峰图及实验报告。

服务周期
BSP-直接测序方法：1~2周
BSP-克隆测序方法：2~4周

服务说明
关于引物    在基于Bisulfite 转化的DNA甲基化检测的方法中，引物是实验成功的关键因素，且因检测的目的基因片段的不同，合适引物的存在与否有较大的不确定性，请尽量采用经过验证的引物，如需DNA甲基化检测引物设计服务，价格另议。

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途