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参考报价: | 面议 | 型号: | 染色质免疫共沉淀(ChIP) |
品牌: | 淳风生物 | 产地: | 西安 |
关注度: | 23 | 信息完整度: | |
样本: | 典型用户: | 暂无 |
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一、 实验原理:
染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation, ChIP)是目前研究体内DNA与蛋白质相互作用最为主要的方法之一。本实验的原理是在活细胞状态下通过化学交联剂将蛋白质-DNA复合物固定,并将其随机打断成一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学的方法沉淀出目的蛋白质-DNA复合体,从而特异性地富集与目的蛋白相结合的DNA片段。通过对目的DNA片断的纯化与检测,最终获得蛋白质与DNA相互作用的信息。染色质免疫共沉淀技术广泛的应用于表观遗传(组蛋白等)分析,转录因子结合位点分析等蛋白质与DNA结合的试验分析中。随着第二代测序技术的逐步完善和成熟,染色质免疫共沉淀结合第二代高通量测序技术(ChIP-seq)正逐步成为基因调控网络研究中一种非常有效的研究手段。
二、实验步骤
A]实验材料的交联处理(室温):
B]实验材料的染色质抽提(4度):
C]染色质的超声波片段化(4度):
D]染色质前处理和免疫共沉淀(4度):
孵育抗体和磁珠
染色质的预处理
免疫沉淀
E]洗脱蛋白质-DNA复合物并释放DNA(4度):
F]纯化DNA(室温):
G]对ChIP DNA进行定量:
三、实验结果
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%;
Fold Enrichment = [%(ChIP/Input)] / [%( Negative control/Input)]
实验报告(实验仪器设备、试剂、实验方法、数据分析结果)
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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途