RNAi抑制基因表达的原理
 

       Dicer酶将dsRNA切割成19-21bp的双链RNA(siRNA)，每个片段的3’端都有2个碱基突出。siRNA双链结合一个核酶复合物从而形成RNA诱导沉默复合物(RNA-induced silencing complex，RISC)。ATP依赖的siRNA解双链激活RISC，激活的RISC通过碱基配对定位到靶标RNA转录本上，并在距离siRNA3’端12个碱基的位置切割靶标RNA，致使靶标基因的表达量降低。
RNAi抑制载体一般表达shRNA，Dicer酶将shRNA切割成siRNA。
 

抑制表达载体介绍

       pLV.I：具有copGFP（GFP的一种变体）荧光标记基因和Puro抗性基因。



        pLV.I2：具有copGFP荧光标记基因和BSD抗性基因。

 

pLV.I3：具有mCherry（RFP的一种变体）荧光标记基因和Puro抗性基因。



pLV.I4：具有mCherry荧光标记基因和BSD抗性基因。


         以上抑制表达载体均是第三代慢病毒载体，可用于构建稳定细胞株，具有荧光标记基因和抗性基因，H1启动子驱动shRNA大量表达，进而抑制目的蛋白编码基因、LncRNA和miRNA表达。荧光标记基因便于检测抑制表达载体的转化效率、慢病毒滴度和慢病毒的转染效率。抑制表达质粒构建流程

抑制表达质粒构建服务说明

1、客户提供基因名称和基因编号。
2、HYY提供：
       （1）20μg抑制表达质粒，浓度500ng/μL以上，超螺旋率95%以上；
       （2）500μL抑制表达质粒的菌液；
       （3）抑制表达质粒的测序图谱、酶切鉴定结果和序列；
       （4）抑制表达质粒构建报告。
3、实验周期1～2周。
 

 

基因抑制质粒信息由广州辉园苑医药科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于基因抑制质粒报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途