如何利用磁性生物打印技术的HepG2细胞球进行凋亡检测

2024-02-02

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应用领域细胞生物学
样品 HepG2细胞
项目生物打印

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型号SpectraMax iD3

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摘要

一个多世纪以来，人们都在使用 2D 环境进行细胞培养和研究，然而，最近的研究表明，与体内细胞相比，2D 培养的细胞在生理学和细胞反应方面有着明显的不同 ( Duval 等，2017 )。目前，已经有多种将 2D 培养物转化为 3D 球体培养物的方法，但是其中很多方法需要花费比较长的时间来生成 3D 细胞球，而且经过不同实验条件的处理，这些 3D 球体很难长时间维持活力。

本文介绍了一种快速生成 3D 细胞球进行培养的简便方法：德国 Greiner Bio-One 的 384 孔生物打印试剂盒 (384-Well Bioprinting Kit)，使用该试剂盒生成的 3D 细胞球可在培养基中持续培养长达三周的时间。首先，用 NanoShuttle- PL 处理 2D 培养的细胞并进行磁化，首先 NanoShuttle- PL 进行处理，其是由金，氧化铁和聚 L-赖氨酸组成的一种生物相容性纳米颗粒，它们可以与细胞膜非特异性结合。然后，将它们用胰蛋白酶消化并转移到低吸附的 384 孔板中，该板放置在 384 孔球体磁力器上，384 孔球体磁力器是由位于板孔下方的 384 个圆形磁体阵列组成，使得磁化的细胞能够在孔底聚集生成球状体，这个磁性打印过程可能需要 15 分钟至几个小时，最后生成的这些 3D 细胞球培养物可以耐受各种实验条件的处理。

本次试验介绍如何使用 Greiner Bio-One (m 3D) 的磁性 3D 细胞培养系统对 HepG2 细胞进行生物打印。用诱导细胞凋亡的化合物处理获得的 3D 细胞球，并使用 Molecular Devices EarlyTox TM Caspase-3/7-D NucView 488 检测试剂盒进行检测分析，在配置了SpectraMax®MiniMax 300 细胞成像模块的 SpectraMax®i3x 多功能微孔读板机上进行成像，并使用 SoftMax®Pro 软件进行分析并得到定量的结果。

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