如何利用磁性生物打印技术的HepG2细胞球进行凋亡检测

一个多世纪以来，人们都在使用 2D 环境进 行细胞培养和研究，然而，最近的研究表 明，与体内细胞相比，2D 培养的细胞在 生理学和细胞反应方面有着明显的不同  ( Duval 等，2017 )。目前，已经有多种将  2D 培养物转化为 3D 球体培养物的方法，但 是其中很多方法需要花费比较长的时间来 生成 3D 细胞球，而且经过不同实验条件的 处理，这些 3D 球体很难长时间维持活力。 

本文介绍了一种快速生成 3D 细胞球进行培 养的简便方法：德国 Greiner Bio-One 的 384 孔生物打印试剂盒 (384-Well Bioprinting  Kit)，使用该试剂盒生成的 3D 细胞球可在 培养基中持续培养长达三周的时间。首 先，用 NanoShuttle- PL 处理 2D 培养的细 胞并进行磁化，首先 NanoShuttle- PL 进 行处理，其是由金，氧化铁和聚 L-赖氨酸组 成的一种生物相容性纳米颗粒，它们可以 与细胞膜非特异性结合。然后，将它们用 胰蛋白酶消化并转移到低吸附的 384 孔板 中，该板放置在 384 孔球体磁力器上，384  孔球体磁力器是由位于板孔下方的 384 个圆 形磁体阵列组成，使得磁化的细胞能够在 孔底聚集生成球状体，这个磁性打印过程 可能需要 15 分钟至几个小时，最后生成的 这些 3D 细胞球培养物可以耐受各种实验条 件的处理。 

本次试验介绍如何使用 Greiner Bio-One  (m 3D) 的磁性 3D 细胞培养系统对 HepG2  细胞进行生物打印。用诱导细胞凋亡的化合 物处理获得的 3D 细胞球，并使用 Molecular Devices EarlyTox TM Caspase-3/7-D NucView 488 检测试剂盒进行检测分析， 在配置了SpectraMax®MiniMax 300 细胞 成像模块的 SpectraMax®i3x 多功能微孔读 板机上进行成像，并使用 SoftMax®Pro 软 件进行分析并得到定量的结果。