Milliplex高通量多因子检测平台

Milliplex多因子检测技术简介： 
Milliplex 多因子检测技术（xMAP技术）是将流式检测技术与芯片技术有机地结合在一起，以微球作为反应载体，实现了多种蛋白分子同时定量检测。  

(4G平台手册P3)

Milliplex多因子检测技术优势：

• 涉及领域zei广泛：免疫，神经，代谢，干细胞，心血管疾病,肿瘤，信号通路等。

• 样本需求少：只需25-50ul的样本，可同时检测多达四十多种蛋白标志物。

• 选择灵活：提供Pre-mix试剂或自由挑选因子组成一个自选试剂盒的两种选择。

• 操作流程简单。

• 超过900种蛋白因子可供选择。

• All-in-one-box，试剂盒中提供了实验所需要的所有试剂。

Milliplex多因子检测试剂盒新的应用：

1、Milliplex多因子检测技术在干细胞研究中的应用：
       诱导多能干细胞（iPSC）一直是今年来干细胞研究领域的热点。日本科学家Yamanaka （中山伸弥）在2012年因为iPSC获得了今年诺贝尔医学奖。Yamanaka教授筛选出了4个诱导多能干细胞相关基因（Oct4，Nanog, Sox2和c-Myc ），将人的表皮细胞诱导成为具有胚胎干细胞活性的细胞，并具备定向分化为心肌细胞和神经细胞的能力，因此也具备了心血管等疾病治疗的潜力。我们zei新推出的试剂盒检测的指标与Yamanaka教授筛选的指标完全相同（Oct-3/4, Sox2, Nanog 和c-Myc），可用于对iPS细胞的干细胞状态进行评价。 
       传统干细胞标志物的检测方法包括了ICC, WB或FC. 新方法Milliplex多因子检测技术的优势不单单在于干细胞用量少，所用时间短，更重要的是该方法可以对干细胞标志物同时进行绝对定量检测，有助于对iPS细胞状态进行准确和灵敏的判断。

图1 在诱导多能干细胞（iPSC）和对照细胞系HeLa（子宫颈癌细胞）、Ntera-2cl.D1（人胚胎睾丸癌细胞）中四个因子的表达。HFF细胞是用以制作iPSC 获得干细胞的细胞系。结果显示iPSC 中4 个干细胞相关因子的表达与对照细胞系HeLa 及 Ntera-2cl.D1 的区别。

2、Milliplex多因子检测技术在细胞凋亡研究中的应用：
       细胞凋亡与肿瘤，神经退行性疾病（阿尔兹海默症/帕金森病），自身免疫性疾病（类风湿关节炎，多发性硬化和I型糖尿病）以及代谢性疾病，心血管疾病等息息相关。一直是科研工作者研究的热门领域。 

       在目前凋亡研究中，IHC, WB, ELISA等常用检测方法都是对凋亡相关因子进行单指标检测，无法对凋亡通路进行完整的分析。而默克密理博今年新上市的Milliplex多因子检测试剂盒却为凋亡通路的整体研究提供了可能。

图2：茴香霉素，紫杉醇或喜树碱处理白血病细胞Jurkat 和人肺癌细胞A549, 进行多重检测分析。宫颈癌细胞HeLa（λ-磷酸酶处理）作为阴性对照，从结果来看，茴香霉素能够刺激Caspase-9（内源性凋亡）和JNK 相关的Jurkat 细胞早期凋亡，而紫杉醇中Bcl-2 和Akt 的高表达显示了Jurkat 细胞对紫杉醇不敏感。喜树碱则明显能够抑制A549 细胞增殖，因此样本处理：25μM 茴香霉素处理白血病细胞Jurkat （4 小时）或5μM 紫杉醇（过夜），5μM喜树碱处理A549 细胞（过夜）。处理后用含蛋白酶抑制剂的MILLIPLEX^® MAP 裂解液裂解细胞。20μg 的总蛋白用MILLIPLEX^® MAP 检测“Assay Buffer2”稀释，实验过程依照产品说明书。（裂解液4o℃孵育过夜）。用Luminex^® 系统检测平均荧光强度（MFI）。结果表示是三次重复实验的平均值和标准偏差。

3、Milliplex多因子检测技术在肿瘤转移研究中的应用：
       肿瘤转移是一个复杂的过程，往往与多种细胞因子和趋化因子相关。默克密理博新推出的人癌细胞转移试剂盒利用生物标志物（Biomarker）对多种肿瘤转移进行检测。有助于癌细胞转移的早期发现，对肿瘤治疗效果及预后进行评价。 
       人癌细胞转移试剂盒(Cat.# HCMBMAG-22K)可以同时对肿瘤转移相关的 9个因子同时进行绝对定量检测，zei高检测灵敏度可达0.3pg/ml，大大提高了肿瘤转移检测的精确性和灵敏性。 

正常样品与肿瘤样品的对比。肿瘤样本包含了从不同治疗患者上取得的不同阶段的肿瘤。

正常样品与肿瘤样品的对比。肿瘤样本包含了从不同治疗患者上取得的不同阶段的肿瘤。

Milliplex高通量多因子检测平台

转化医学及精准医学研究的系统化平台

Merck Life Science液相芯片检测平台，开创生物标志物检测完整平台及一站式服务

检测平台：

Merck-life Science提供所有基于xMAP技术的检测仪器，FLEXMAP 3D®, Luminex200™, MAGPIX®。独特的仪器维护校验、校正系统为客户得到多重精确的数据检测提供了坚实的保障。

软件平台：

Merck Life Science为更准确的数据对比和分析提供Luminex®原厂软件xPONENT®、专业定量分析软件Milliplex-Analyst，为您更高效地获得更高效的数据分析提供强有力的保证。为更高效的数据分析和结果对比提供有力的工具。

应用平台：

Merck-life Science是蛋白生物标志物检测的领导者，为多种疾病检测提供广泛的试剂应方案：包括癌症、免疫疾病、心血管疾病、代谢疾病、神经退行性疾病等，以及肾毒性、信号转导研究等。MerckLife Science提供超过8个种属1200种生物标志物的选择。

服务平台：

近40年的研发经验积累，打造了Merck Life Science BiomarkerService金牌服务。十几家Milliplex认证实验室，遍布主要区域，让你享受在身边的高品质服务。

检测平台 —

Luminex® 液相芯片分析仪介绍

Luminex®多功能液相芯片分析平台

快速悬浮液相芯片，转化医学全进程研究的系统化平台！

新生物标志物研发都会经历生物标志物的发现、功能确定、标志物在疾病中验证、到临床检测的过程。在研发前期主要通过蛋白组学/基因组学等技术进行高通量指标数的筛选。在Biomarker功能确定、验证、临床验证的转化过程中，需要多重指标和中高通量样本筛选，这就需要多重指标的高通量样本筛选平台。新药发现与生物标志物相同，对先导化合物药效确定到临床测试都需要多重检测的中高通量样本检测平台。Luminex®多功能液相芯片可以提供1-500重指标的96/384孔板检测，是新Biomarker发现之后zei佳的筛选平台。为新的治疗方法的转化医学研究提供强有力的技术保障。

Luminex ®多重检测技术的核心即xMAPzl的编码微球系统

xMAP创新技术真正实现了：

• 多重检测：实现1-500重因子同时检测，为微量样本的精确检测提供技术保障；

• 高灵敏度：精密的光学设计提升检测灵敏度，低至0.04pg/ml；

• 快速/高通量：96/384孔板自动化高通量检测，每小时数据量可达9,600个结果

• 微量样本：10-50ul的样本量使得跟踪动物模型的阶段性变化成为可能，避免个体差异带来的实验误差。

软件平台 — Luminex® xPONENT®操作软件

和Milliplex™ Analyst数据分析软件

应用平台

提供超过8个种属1200种生物标志物的选择，涵盖肿瘤、免疫疾病、心血管疾病、代谢疾病、神经退行性疾病等、肾毒性、干细胞、信号转导研究等十几个热门研究领域。

服务平台 — Merck Life Science Biomarkerservice和Milliplex认证实验室为您提供高品质实验服务

Erenna®单分子免疫检测平台

生物标志物检测突破性技术，灵敏度高达到ELISA的1000倍

Erenna®单分子免疫检测技术是蛋白生物标志物检测领域的突破性新技术。利用激光聚焦于爱里斑中单个荧光标记分子，人类首次实现了在单分子水平对蛋白进行计量，并造就了1000倍于ELISA技术的超高检测灵敏度。Erenna®单分子检测技术具备宽至4个log的大动态检测范围，可根据靶标丰度和成本灵活选择实验方案，便于自行开发检测试剂盒，接近于ELISA的易用性等特征。该技术已被广泛应用于多种疾病生物标志物的检测，包括心血管疾病，炎症，糖尿病，神经疾病，癌症等等，使研究者对生物标志物的应用和认识达到了全新的高度。更重要的是，针对创新性生物标志物的研究，Erenna®免疫检测系统提供工具，帮助研究者便捷地自行开发和优化检测试剂盒，实现全新生物标志物的高效率检测。默克的Erenna®仪器平台、试剂盒以及专家定制化服务为疾病和生物标志物研究提供三位一体的研究工具，必将加速和助力转化医学研究。

Erenna®单分子检测技术的主要特点：

1. 突破性的超高检测灵敏度

Erenna®单分子检测技术与ELISA操作一样简便，但灵敏度可达到ELISA的约1000倍，成功实现浓度在fmol级别蛋白靶标的检测。高能量的激光通过爱里斑聚焦于溶液里的单个荧光素标记二抗分子，产生的荧光闪烁进行数字化计量，从而实现“单分子检测”。灵敏度远高于传统ELISA，Multiplex等技术的全新单分子检测方法使种类远多于已知蛋白的未知蛋白靶标检测成为现实，将带来全新的基础和转化医学新发现。

2. 宽至4个log的大动态检测范围

Erenna®动态检测范围超过4个log，有利于蛋白靶标表达量存在巨大差异的样本进行同时检测。

3. 根据靶标丰度灵活选择实验方案

Erenna®既可使用磁珠又可使用普通96孔板作为抗体包被介质。在灵敏度和成本方面取得了巧妙平衡。

4. 便于自行开发检测试剂盒

开创性的新技术往往会应用于开创性的工作。如果检测的是全新的标志物，默克提供整套的试剂盒开发工具，可在极短时间

内开发新检测试剂盒。