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蔡司Lightsheet 7激光片层扫描显微系统

tel: 400-6699-117 6251

蔡司激光共聚焦显微镜, 蔡司Lightsheet 7激光片层扫描显微系统,助您高效便捷地实现活体和透明化样品的多视角成像。......

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技术特点
【技术特点】-- 蔡司Lightsheet 7激光片层扫描显微系统



[ 产品特点 ]

1. 成像更深、速度更快、极低的光损伤

2. 适用于不同透明化制样

3. 全新样品定位方法创建多视角 (Multiview)数据,灵活的观察视野

4. 高灵敏度,高信噪比

5. 专业扫描技术获得高质量图像

 

[ 应用领域 ]

1. 发育生物学:胚胎发育、器官发育等动态过程快速成像

2. 大型固定样品结构成像

3. 不同透明化样品成像

4. 三维细胞培养

5. 植物学

等生命科学领域研究

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拟南芥花的发育图像-样品:图片由捷克共和国布尔诺市马萨里克大学中欧技术研究院(CEITEC)的S. Valuchova、P. Mikulkova和K. Riha提供。


蔡司Lightsheet 7

用于活体和透明标本的多视图成像的光片显微镜



生命科学研究可能对您的成像能力提出很高的要求:有时,您需要在整个生物模型生物,组织和细胞发育过程中对其进行成像。具有独特照明原理的光片荧光显微镜(LSFM)是对此类标本进行快速且柔和成像的理想选择。Lightsheet 7的出色稳定性使您可以长时间(甚至几天)观察活体样品,光毒性比以往任何时候都要小。更重要的是,使用此光片显微镜将大面积光学清除的标本成像到托托内,并具有亚细胞分辨率。使用专用的光学元件,样品室和样品架增强Lightsheet 7的性能,以准确调整您选择的清除方法的折射率,然后对大型样品(甚至整个小鼠的大脑)成像。  

特点

  • 图像光学清除的标本

选择哪种光学清除方法取决于要成像的组织类型,荧光标记和样品本身的大小。Lightsheet 7旨在匹配所有这些不同条件。现在,您可以在几乎所有清洁溶液中以任何介于1.33和1.58之间的折射率对最大2 cm的样品成像。这款稳定的统包式光片显微镜可让您以亚细胞分辨率获取概览图像和数据。无论您是使用光学透明的类动物体,椭球体,器官,大脑还是其他标本,Lightsheet 7都是您进行快速,柔和LSFM成像的首选显微镜。  

C57 BL6J小鼠灌注了PBS,CellTracker™CM-DiI染料和4%PFA。使用iDISCO +协议清除后,最终的RIMS为肉桂酸乙酯。

样本提供:
哈佛大学Erin Diel;哈佛大学生物成像中心,美国马萨诸塞州剑桥市Divinity Ave 16号2052室,美国马萨诸塞州02138


  • 获得最佳图像质量和稳定性

借助易于使用的Lightsheet 7,您的LSFM成像将进一步发展,以解决各种应用并获得最佳图像质量。全新设计的光学元件和样品室可让您调整至理想的折射率。新的样品架使安装更大的样品变得简单。智能软件工具可帮助您调整成像参数,例如光片和样品位置,正确的缩放设置,平铺和位置以及数据处理参数。所有这些新功能都与可靠的蔡司圆柱透镜光学系统和激光扫描相结合,产生照明光片。添加获得zl的数据透视扫描技术,并获得具有最佳图像质量的无伪影光学部分。

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  • 观察现实生活-快速而敏感

现在,您的Lightsheet 7具有pco.edge sCMOS检测器的高量子效率,可以在最低的照明光水平下观察最快的过程。您将获得样品的真实视图,而不会受到激发光对其样品生物学的不利影响。对于垂直方向的样品和最高的帧频,请选择CMOS检测器Axiocam 702:一个特殊的样品室可提供加热,冷却和CO2,以保持实验的理想环境。添加Multiview和触发选项以控制外部设备– Lightsheet 7是您理想的光片显微镜,用于观察几乎无限范围的生物体中的实时过程。

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拟南芥花卉开发–样本:由捷克共和国布尔诺Masaryk大学中欧技术学院(CEITEC)的S. Valuchova,P。Mikulkova和K. Riha提供。

薄板荧光显微镜的原理

灯片荧光显微镜(LSFM)将荧光激发和检测分为两个独立的光路,照射轴垂直于检测轴。这意味着您可以一次照亮样品的单个薄切片,通过仅激发聚焦平面上的荧光来生成固有的光学切片。无需针孔或图像处理。来自聚焦平面的光被收集在照相机的像素上,而不是例如在共聚焦或其他激光扫描显微镜中逐个像素地收集。与其他许多显微镜技术相比,基于相机的探测器上的图像采集可以使您以更快的速度,更少的激发光采集图像。总之,LSFM将光学切片效果与从完整焦平面的并行图像采集相结合。这使得3D成像极其快速且非常高效。

检测光学器件与照明光学器件的解耦使得能够使用低数值孔径的专用透镜进行荧光激发,而不会牺牲检测分辨率和灵敏度。这使得LSFM成为毫米级样品成像的理想选择,例如发育中的生物或大型清除的组织样品。

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Lightsheet 7的工作原理


观看动画,了解使用蔡司Lightsheet 7放置和成像样品的难度。


zl的枢轴扫描仪

提供均匀照明

当光片穿过样品时,样品的某些结构(例如核)会吸收或散射激发光。如左图所示,这将沿照明轴投射阴影。该效应在所有荧光显微镜中均会发生,但是光片荧光显微镜中的照明轴与观察轴垂直,因此这种效应更加明显。在Lightsheet 7中,获得zl的Pivot扫描仪可在图像采集过程中向上和向下改变光板的角度。通过更改照明角度,阴影将朝不同的方向投射,并且激发光还将到达不透明结构后面的区域,如右图所示。这款获得zl的Pivot Scanner是获取无伪影图像并改善下游处理和分析步骤的理想方法。始终最好从源头开始处理工件。

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©U. Roostalu,丹麦古布拉。

蔡司Lightsheet 7工作

肾内科

通过iDISCO协议清除的小鼠肾脏,并在肉桂酸乙酯中通过ZEISS Lightsheet 7检测光学元件5×/ 0.16 foc和Clr 20×/ 1.0 nd = 1.53(插入)成像。用DyLight 594缀合的番茄凝集素灌注小鼠,以观察脉管系统和肾小球(红色)。绿色:自动荧光以可视化组织解剖结构。肾小球大小和数目的3D全器官成像和计算图像分析有助于更好地了解各种肾脏疾病(例如糖尿病性肾病)的机制。加工与arivis Vision4D ®对含水层HIVE。


样本由丹麦古布拉市的U. Roostalu提供。


样本由丹麦古布拉市的U. Roostalu提供。

发展生物学

P10小鼠气管的3D数据集,显示了机械感觉神经纤维的解剖结构。染色:DAPI,胶原IV(Alexa 488抗体),感觉纤维(表达tdTomato的报告株,Alexa 555抗体),神经丝蛋白NF200(有髓神经纤维,Alexa 647抗体)。
样品在PEGASOS(Jing等人,2018,细胞研究)中以BB-PEG成像,在RI为1.54的条件下使用5x / 0.16 foc检测光学元件和Cl r 20x / 1.0 nd = 1.53进行成像。5倍放大率数据集:像素缩放0.61×0.61×1.63微米,3×3瓦片,缩放1.5倍,1230 Z截面,体积2.57×2.58×2毫米20×放大率数据集:像素缩放0.23μm×0.23×0.58微米,1×5瓦片,缩放1.0×,4206 z截面,体积2.0×0.45×1.82 mm。

 

样品由P.-L提供。Ruffault,C。Birchmeier,发育生物学/信号转导实验室;A. Sporbert,M。Richter高级光学显微镜;德国柏林分子医学中心M.Delbrück。


脊椎动物的肢体,脊髓再生

am具有显着的再生其四肢和脊髓的能力。分子遗传学工具可以识别负责这种复杂再生的干细胞,以及启动其增殖的损伤反应性信号。该轴突前臂已在肉桂酸乙酯中清除(Masselink,W. et al.Development 146,(2019)),并用5×/ 0.16 foc检测光学元件成像,折射率为1.57。在ACQUIFER HIVE数据平台上,使用ZEN成像软件和arivisVision4D®软件对多区块数据集进行对齐,融合和渲染。

样品由IMP公司分子病理研究所Tanaka实验室的W. Masselink提供。

图片由奥地利维也纳IMP BioOptics公司的P.Pasierbek,K.Aumayr提供。

神经形态学

由于神经元的形态极为复杂,并且在整个器官中扩散,因此对人脑中的整个细胞进行成像几乎是不可能的。类器官可以在一定程度上重现人脑,包括从神经元干细胞培养物中产生神经元。通过ECi清除,可以从本地到全局研究神经元形态,这为3D神经元形态研究提供了令人着迷的可能性。
稀疏标记有GFP / tdtomato(3%GFP和3%tdtomato)的35日龄神经元类器官,用Clr 20x / 1.0 nd = 1.53物镜成像。
像素缩放:222×222×567 nm。
图像体积:1.66×0.66×1.6毫米。

样本由奥地利维也纳IMBA的D. Reumann和J. Knoblich提供。

免疫学

以3D方式对完整的淋巴器官成像可以分析和量化对病毒感染的免疫反应。在收获之前,将T细胞转移到野生型宿主小鼠中。使用Ce3D(Li等人PNAS 163,2017)清洁,固定和清理节点,然后使用5x / 0.16检测光学元件(体积2.5×2.5×1.6 mm)以RI = 1.49(ph 7)成像。图像显示了GFP标记的天然CD8 + T细胞(黄色),B细胞的卵泡用B220(蓝绿色)和CD31脉管系统网络(洋红色)染色。

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样本由澳大利亚沃尔特和伊丽莎·霍尔医学研究所的乔安娜·格鲁姆(Joanna Groom)提供

整个小鼠大脑的脉管系统映射

给C57 BL6J小鼠灌注PBS和4%PFA。灌注Cell-Tracker™CM-DiI染料对大脑进行染色-一种用于标记
脉管膜的脂质染料。使用iDISCO +协议清除样品,该协议在肉桂酸乙酯中平衡,作为最终的RIMS。然后将其在肉桂酸乙酯中以RI = 1.565成像,并在Translucence Mesoscale成像室中使用Fluar 2.5X / 0.12光学检测镜进行成像。

使用Clr Plan-Neofluar 20×/ 1.0 Corr nd = 1.53获取右侧的高分辨率插入图像。
在像素分辨率为1.83×1.83×6.77μm的情况下,图像体积为13.1×13.1×6 mm。它是在大约40分钟内以866个z截面的4×4瓦片获得的。
数据量为93 GB。数据PR ocessed与ZEN成像软件和arivis Vision4D ®的含水层HIVE数据平台上。

样本由美国剑桥哈佛大学的E. Diel,D。Ric Hardson提供。

映射整个小鼠大脑的神经元和浦肯野细胞

使用CLARITY协议清除PV-tdtomato小鼠的大脑,并在EasyIndex中以RI = 1.46的折射率进行最终成像。
产生tdtomato的Parvalbumin-Cre的表达-Parvalbumin在整个大脑的小神经中枢和小脑的Purkinje细胞中表达。在蔡司Lightsheet 7上以5倍/ 0.16 foc的检测光学元件获取整个大脑数据集。图像体积为11×20×8.8 mm,像素分辨率为0.91×0.91×5.35μm(12028×22149×1621体素)。它是在6×10瓦片,1621个z截面中获取的。数据量为1.2 TB(拼接后为805 GB)。数据用ZEN成像软件和arivis Vision4D处理®一个含水层HIVE数据平台上。

样本由E. Diel,D。Ric Hardson提供。哈佛大学,美国剑桥。






【技术特点对用户带来的好处】-- 蔡司Lightsheet 7激光片层扫描显微系统


【典型应用举例】-- 蔡司Lightsheet 7激光片层扫描显微系统


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