一、实验准备 (一) 实验器械准备1． 玻璃器皿(1) 清洗：新领用的玻璃器皿（包括平皿，玻璃培养瓶，刻度吸管，滴管，离心管等）应先用自来水冲洗后，放入肥皂水中浸泡20分钟，再用柔软的试管刷轻轻刷洗，流水冲净后，晾干后备用。实验用后的玻璃器皿应去除器皿上的胶布，棉花，及时用自来水冲洗，并浸入水中，待进一步清洗（同上步骤）。 (2) 泡酸：清洗晾干的玻璃器皿需放入清洁液中浸泡，以去除刷洗不掉的极微量杂质。浸泡时，必须使器皿内充满清洁液，勿留气泡。浸泡时间一般需过夜，2～3天为宜。 附：常用清洁液配方： 重铬酸钾 63g

浓硫酸（可用工业硫酸） 1000ml 蒸馏水 200ml 配酸时，应先用蒸馏水将重铬酸钾充分溶解后，将浓硫酸慢慢加入。注意：注入过急产热量过大，易发生危险！ (3) 泡酸后清洗：泡酸后的玻璃器皿必须用水充分冲洗。冲洗时每一个玻璃瓶、管都应用水灌满，倒掉，如此重复15次以上，最后再用蒸馏水或去离子水冲洗3遍，晾干后备用。 (4) 包扎：清洁的玻璃器皿应及时用牛皮纸包扎，以免被污染。大的玻璃瓶用牛皮纸封口，棉线扎紧；小的玻璃瓶直接倒立放入垫有牛皮纸的铝饭盒中；玻璃离心管管口向内放入垫有牛皮纸的铝饭盒中；玻璃吸管、滴管需在吸管上部塞入2～3cm的脱脂棉花后，放入底部垫有柔软棉花或纱布的玻璃或铁制的消毒桶中；玻璃平皿、培养瓶应用牛皮纸完全包裹，备用。 (5) 消毒：包扎处理的玻璃器皿放电热鼓风干燥箱中干烤消毒。130℃持续100分钟。消毒完成后30分钟方可打开箱门。消毒后的器皿应放无菌间内，备用。消毒器皿应及时使用，如消毒时间超过2周必须重新消毒。紧急情况下，玻璃器皿也可高压蒸汽消毒，15磅20分钟。 2． 橡胶制品(1) 清洗：新领的胶塞用自来水冲洗后，用2％NaOH煮沸20分钟，自来水冲洗，再用1％稀HCL浸泡30分钟，自来水冲洗，用PH试纸测试自来水和胶塞滴下的水滴的PH值一致即可，然后用蒸馏水或去离子水冲洗2～3遍，最后用蒸馏水或去离子水煮沸30分钟，晾干后备用。使用过的胶塞、离心管盖应及时用自来水冲洗，浸入水中集中处理。用自来水冲洗数次，去离子水或蒸馏水清洗2次，去离子水或蒸馏水煮沸30分钟，晾干备用。长期使用过脏的胶塞应同新领的胶塞一样用酸硷处理。老化的胶塞应抛弃。 (2) 包扎：洗净的胶塞用干净的牛皮纸完全包裹，一般2～3个裹在一起。每个单独包裹的胶塞放入垫有牛皮纸的铝饭盒中，备用。洗净的离心管塞倒立放入垫有牛皮纸的铝饭盒中，备用。 (3) 消毒：放有干净胶塞的铝饭盒放入高压蒸汽消毒锅中湿热消毒。10磅15分钟。消毒的胶塞放无菌间，备用。消毒时间超过2周应重新消毒。 3． 金属器械(1) 清洗:新领的金属器械用洗洁净液轻轻擦洗，然后用自来水冲净，去离子水或蒸馏水清洗2次，放入孵箱中，烘干备用。用过的金属器械应及时清洗，用自来水冲净后，去离子水或蒸馏水清洗2次，烘干备用。 (2) 消毒：清洗过的金属器械放入干净的铝饭盒中，加入适量去离子水或蒸馏水煮沸30分钟，趁热倒掉热水，放入孵箱中，烘干备用。金属器械应现用现准备，以免污染。紧急情况下，金属器械也可高压蒸汽消毒，15磅20分钟。 4． 塑料制品实验室购进的大部分塑料制品为一次性使用，是一种无毒并已消毒灭菌后密封包装的商品，开袋即可使用。一般不重复使用，必要时可处理后再用。 (1) 清洗：使用过的塑料制品如培养板应及时用自来水冲洗，用棉花签或纱布逐孔轻轻擦洗，放入超声清洗机中超声清洗，每次20分钟，共3次，最后一次应用去离子水或蒸馏水清洗，烘干备用。 (2) 泡酸：清洗过的塑料制品如培养板浸入酸缸中4～6小时即可。 (3) 泡酸后清洗：泡酸后的塑料制品必须用水充分冲洗。冲洗时每一个孔都应用水灌满，倒掉，如此重复15次以上，最后再用蒸馏水或去离子水冲洗3遍，晾干后备用。 (4) 消毒：处理好的塑料制品如培养板放置在超净工作台上，紫外线照射2～3小时后，即可使用。塑料制品应现用现准备，以免污染。 (二) 培养用液的准备1． D－Hank′s液(无钙镁Hanks液) 配方：Nacl 8.0g

Kcl 0.40g

Na2HPO4…H2O 0.06g

KH2PO4 0.06g

NaHCO3 0.35g

葡萄糖 1.00g

酚红 0.02g (1) 按上表所示准确称量试剂（试剂质量要求分析纯以上）。 (责任编辑：大汉昆仑王)