免疫磁珠分选的问题
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问:
现用免疫磁珠(美天妮)分选cd4+和cd8+T淋巴细胞,效果不是太理想。单个核细胞2×106,分离出cd4+只有1×105个,buffer等试剂都没有问题。不知道还有什么地方没有注意到,希望各位战友指点?
答:
呵呵,我也用美天妮分离CD14+单核细胞,结果还不错。
分出的细胞占单个核细胞五分之一。
我是根据说明书进行操作的,觉得以下几方面比较重要:
(1) 细胞计数要准确,不能超过上样量。
(2) 预冷磁珠分离液。
(3) 磁珠分离缓冲液不能有气泡
(4) 不能让分离柱干掉
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