重组DNA技术与基因工程(组图)
关键词: 重组DNA技术 基因工程来源: 互联网
重组DNA技术是现代分子生物技术发展中最重要的成就之一。即是基因工程(Gene Engineering)的核心技术。
重组DNA技术(Recombinant DNA Technique)是人类根据需要选择目的基因(DNA片段)在体外与基因运载体重组,转移至另一细胞或生物体内,以达到改良和创造新的物种和治疗人类疾病的目的。
这一技术的发展和应用,关键在于限制酶的发现和应用。
一、限制酶
限制性内切核酸酶(restrictive endonucleases),又称限制酶。是特异性地切断DNA链中磷酸二酯键的核酸酶(“分子手术刀”)。
发现于原核生物体内,现已分离出100多种,几乎所有的原核生物都含有这种酶。是重组DNA技术和基因诊断中重要的一类工具酶。
1、限制酶的命名
根据其来源命名。如:
EcoRI来源于大肠杆菌E.coli的RY13菌株,I指在该菌株中分离的第一个限制酶。
2、限制酶识别序列和切割形成
每种限制酶能识别和切割的通常4~8个核苷酸序列,称为限制性位点或切点。
部分常用限制酶及切点
推荐方法
- DNA的Feulgen染色法
- DNA重组技术常用酶
- 分子实验方法5:重组质粒的连接、转化及筛选
- 用考马斯亮蓝R-250染色
- Methyltransferase-based single-promoter analysis assay
- In situ immunodetection of 5-methylcytosine (5-mC) on squashed cells using anti-methylcytosine
- CaPO4 Transfection for Chromaffin Cells
- 内切酶37°C下的活性
- Rapid Isolation of Genomic DNA from Human Oral Mucosa
- 常用的分子生物学基本技术(三)