MHC-I单体的折叠 此步骤是将HLA-I类分子的重链、轻链以及抗原肽通过折叠形成完整的HLA-I类分子单体。【试剂及设备】1、试剂及配制（1）折叠缓冲液（PH8.3）400mM  L-Arginine(左旋精氨酸)100mM  Tris2mM  EDTA（2）注射缓冲液（PH 4.2）3M  Guanidine HCl（盐酸胍）10mM  NaAcetate(乙酸钠)10mM  EDTA（3）重链，轻链，抗原肽（流感病毒基质抗原肽MP58-66（GILGFVFTL），人工合成9肽）（4）还原型谷胱甘肽，氧化型谷胱甘肽，100mM PMSF（苯甲磺酰氟）2、设备磁力搅拌器与搅拌棒10℃水浴箱1L烧杯5ml注射器1000μl加样器及吸头【操作步骤】（1）         预先在1升的烧杯中准备1升折叠缓冲液，内放一个磁力搅拌棒，置10℃水浴冷却。（2）         向冷却的折叠缓冲液中加还原型谷胱甘肽至终浓度为5mM；再加氧化型谷胱甘肽至终浓度为0.5mM；加PMSF至终浓度为0.2mM（3）         按照终浓度分别为1μM,2μM,30mg/L，计算需加入的重链，轻链，肽的量。（4）         分别将重链，轻链各加入5.0ml注射缓冲液，在室温下分别吸入两支5.0ml注射器。（5）         依据肽的氨基酸序列不同，可将其稀释于500μl双蒸水或DMSO（6）         将装有折叠缓冲液的烧杯置磁力搅拌器上，以高速进行磁力搅拌。（7）         用吸管将抗原肽加入反应体系。（8）         急速将重链（1μM）和轻链用26号针头注入反应体系，针头尽可能靠近磁力搅拌器。加入轻链后，折叠反应体系将会稍稍变得不透明。（9）         将折叠反应体系置10℃过夜。（10）      早晨：仅仅将重链（1μM）注入反应体系（方法如前，反应体系中已有重链2μM），并重置于10℃（11）      晚上：仅仅将重链（终浓度为3μM）注入反应体系，并重置于10℃（12）      10℃过夜。