兔胶体金检测技术之IGSS法操作方法与步骤
关键词: 兔 胶体金 检测来源: 互联网
相关专题 免疫胶体金技术专题
免疫胶体金检测技术是以胶体金(常用的是铁和汞重金属离子)作为示踪标志物应用于抗原 抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金在弱调教下呈负电荷,能和带正电荷的蛋白分子结合,由于这种结合不破坏蛋白活性,而且胶体金比较容易制备,这些特点使得胶体金广泛应用各种领域。
免疫 金银法(IGSS)操作流程
1、脱蜡至0.05mol/LTBSpH7.4缓冲液。
2、抗原 修复。
3、1%卵蛋白(EA)15min,不洗。
4、特异性免疫 抗体37℃120min或4℃20小时。
5、0.05MTBS洗后改0.02MTBS(0.1%BAS)洗10min。
6、1%卵蛋白(EA)15min,不洗。
7、PAG(1:15)(10nm)室温孵育60min。
8、1%戊二醛10min;双蒸水洗5min。
9、1%明胶洗5min;银避光显影8-15min;双蒸水洗15min。
10、用固定液(15%硫酸钠、20%硫代硫酸钠混合液)固定5min。
11、1%戊二醛固定5min;温水洗。
12、核固红或甲基绿衬染,常规脱水封片。
结果:阳性物质呈黑色或黑褐色颗粒。
兔胶体金检测技术可用于免疫组化 和免疫电镜技术。这里总结了免疫金银法(IGSS)操作方法与步骤。
推荐方法
- HLA等位基因序列特异性探针(SSO)及其标记
- 比较好的Western实验步骤
- 可溶性粘附分子
- 病理性自身免疫应答的诱因
- HLA的医学意义
- HLA配型与骨髓移植
- Visualisation of Lymphoid Organ Development
- High Temporal Resolution Imaging Reveals Endosomal Membrane Penetration and Escape of Adenoviruses in Real Time
- Generation of Human Type 1- and Type 2-Polarized Dendritic Cells from Peripheral Blood
- Generation of Fluorescent IgG Fusion Proteins in Mammalian Cells