影响凝胶色谱仪分离特性的因素
影响凝胶色谱仪分离特性的因素有样品分子量、凝胶类型、凝胶粒径、进样体积、样品浓度和流动相流速等。
一、样品分子量：
根据样品分子量选择分级范围较小的凝胶，以提高分离度和处理量。
二、凝胶类型：
1、软质凝胶：
如交联葡聚糖等，水相分离生化体系，适合低中压操作。
2、半刚性凝胶：
较高交联度的苯乙烯和二乙烯苯共聚物，有机相洗脱，可承受10Mpa压力。
3、硬质凝胶：
（1）高交联度苯乙烯和二乙烯苯共聚物：凝胶渗透色谱。
（2）多孔球形硅胶：凝胶渗透色谱和凝胶过滤色谱。
（3）羟基化聚醚多孔微球：凝胶过滤色谱。
三、凝胶粒径：
凝胶粒径越小，理论塔板当量高度（HETP）越小，分离效率越高。
四、进样体积：
进样体积需根据样品分配系数的差别控制在适当的范围内，在不影响分离度的前提下取zui大值。
五、样品浓度：
根据凝胶色谱分离原理知，tr和HETP与样品浓度无关。但实验表明，当样品浓度较高时，洗脱曲线会出现前延或拖尾甚至双峰现象，使HETP极度增大，这主要是样品粘度高造成的。经验表明，样品与流动相的粘度比应控制在2以内。
六、流动相流速。
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