硫酸浓度测定有什么方法
【实验原理】本实验采用蒽酮比色法测定可溶性糖的含量.糖在硫酸作用下生成糠醛,糠醛再与蒽酮作用形成绿色络合物,颜色的深浅与糖含量有关.在625nm波长下的OD值与糖含量成正比.由于蒽酮试剂与糖反应的呈色强度随时间变化,故必须在反应后立即在同一时间内比色.该实验方法简便,但没有专一性,绝大部分的碳水化合物都能与蒽酮试剂反应,产生颜色.【器材与试剂】1.实验仪器分光光度计,恒温水浴,电子天平,烘箱,刻度试管,漏斗2.实验试剂活性炭,乙醇葡萄糖标准液：称取已在80℃烘箱中烘至恒重的葡萄糖100mg,用80%乙醇配制成1000ml溶液,即得每ml含糖为100μg的标准液蒽酮试剂：称取1g蒽酮,溶解于1000ml稀硫酸（将760ml相对密度为1.84的浓硫酸用蒸馏水稀释成1000ml）溶液中,置于棕色瓶中,当日配置使用.3.实验材料植物叶片或种子【实验步骤】1.可溶性糖的提取植物叶片或种子在110℃烘箱烘15min,然后调至70℃过夜.干叶片磨碎后称取50mg样品倒入10ml刻度离心管内加入4ml80%乙醇,置于80℃水浴中不断搅拌40min,离心,收集上清液,其残渣加2ml80%乙醇重复提2次,合并上清液.在上清液中加10mg活性炭,80℃脱色30min,80%乙醇定容至10ml,过滤后取滤液测定.2.绘制标准曲线取20ml带塞试管,编号,按下表配置系列浓度的标准葡萄糖溶液.然后在每只试管中加入5ml蒽酮试剂,混匀,盖上塞子,在沸水浴中煮沸10min（水浴重沸后计时）,取出,立即用水冷却至室温,在625nm波长下,分别测量各管的光密度值,用0号管调零.以光密度为纵坐标,葡萄糖含量为横坐标,绘制标准曲线.
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