植物组织和细胞显微化学染色_显示植物细胞后含物方法
| 实验步骤 | (1) 淀粉：淀粉是植物的主要贮藏物质，它们在各种不同的植物细胞中形成各种形状小同的颗粒。一般来说，淀粉本身具有特殊的性状和光学特性，可以不必用专门的显微化学方法来检视，由于碘与淀粉作用可形成碘化淀粉而呈蓝色反应，用碘－碘化钾溶液来测试淀粉粒已成为最常用的方法。 (2) 蛋白质：植物细胞中的蛋白质是构成原生质体的主要成分，也可成为后含物贮存于细胞内，可能是无定形的，也可能成为结晶体或成为糊粉粒。 ①较普遍的方法是用 I-KI染色，显微镜下观察可看到被染成黄色的圆球状小颗粒，即为储藏蛋白质的糊粉粒。 ②氯化汞－溴酚蓝法是检测糊粉粒的最普通方法：在切片上滴加氯化汞－溴酚蓝试剂（氯化汞10g, 溴酚蓝 1mg, 蒸馏水100mL)1滴，过 5min 后，用 0.5%的醋酸冲洗，除去切片上多余的染料，再放在培养皿中水洗 5mm, 用甘油封藏，细胞中如有糊粉粒则被染成鲜蓝色。③曙红－酒精－苦味酸法也是显示糊粉粒的较好方法：在切片上滴上曙红－酒精－苦味酸试剂（配方曙红 1g, 溶于苦味酸的 95%酒精饱和溶液 50mL), 镜检，当糊粉粒的基质现出蓝色时，加上数滴纯酒精，此时糊粉粒中球蛋白无色而结晶现出黄绿色，吸去多余酒精，用丁香油透明，加拿大树胶封固，最终蛋白质结晶应为黄色，球蛋白为粉红色，基质为暗红色。 (3) 油脂：在植物解剖学研究中，常用苏丹Ⅲ（或苏丹 IV) 溶液对脂肪性物质进行染色切片浸入上述溶液中 24h, 然后用 50% 的酒精洗涤，加上甘油后观察，油脂可被染成淡黄至红色，栓质和角质也同样被染色。如果细胞中存在硬脂或脂肪酸结晶时，染色十分缓慢，可稍加热 (4)单宁：单宁的化学结构比较复杂，它是一种多元酚的衍生物，大多呈胶体状态，存在于植物细胞的液泡中，或形成单独的液泡。将切片浸人 10% 的氯化铁水溶液中（或加－些碳酸钠），单宁物质则被染成蓝绿色。 (5)橡胶：天然橡胶是异戊二烯的聚合物，植物组织中所含橡胶物质大多存在千乳汁管中，也有的存在于液泡中。对存在于乳汁管中的橡胶成分，可以用苏丹Ⅲ溶液染色材料应先用 10%铬酸 +70%酒精（使用前配制）固定 24h, 以使橡胶凝固，用刀片切去1-2mm, 而后徒手切片，于载玻片上加上苏丹Ⅲ或苏丹 Ⅳ溶液染色，乳汁管中的橡胶类物质被染成红色。 展开 |
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