急性中毒物质的快速筛选和检测（五）
方法二(对—邻试纸法)
1原理：氰离子与对—硝基苯甲醛能够缩合为苯偶姻。在碱性条件下，苯偶姻使邻二硝基苯还原，产生典型的紫色反应。
2试剂：
2.1对—邻试纸：取1.5g对—硝基苯甲醛和1.7g邻二硝基苯溶于100ml95%乙醇中，用普通定性滤纸浸泡5min后取出晾干，剪成条备用。
2.2醋酸铅棉花：用10%醋酸铅溶液将脱脂棉浸透后，压除多余水份，100℃以下干燥备用。
2.3碳酸钠饱和溶液：临用时配制。取无水碳酸钠试剂少许，用少量水溶解成饱和状态溶液。
2.4酒石酸固体试剂
3检测操作
操作方法与方法一相同，只是在检氰玻璃管下方松软地塞入醋酸铅棉花。
实验中，如果醋酸铅棉花变为黑色，说明样品中含有硫化物，应重新试验加大醋酸铅棉花的放入量，排除硫化氢的干扰。
本方法的灵敏度高于方法一，在10克样品中。对┅邻试纸对氰化物的检出限为0.02mg，相当于2mg/kg。氰化物的含量越高，试纸显色的时间越快，颜色越深，色泽保留的时间也越长。
APHO-E-06-2005食用油脂酸价和过氧化值快速检测
评价食用油是否符合国家卫生标准，常用的理化指标是酸价和过氧化值。过氧化值超出卫生标准，说明这不是新鲜的油脂并已开始酸败；酸价超出卫生标准，说明油脂正在并已经酸败。但凡由酸败油脂引起的食物中毒其酸价和过氧化值都会很高。
1.作用原理
利用食用油脂酸败所产生的游离脂肪酸或食用油脂氧化所产生的过氧化物与试纸中的药剂发生显色反应，以此反应出油脂酸败或油脂被氧化的程度。
2.实验材料
速测卡：密封包装，4℃～10℃干燥保存。使用的最佳环境温度为25±5℃，环境湿度应在20%以上。从包装中取出的试纸条应在10分钟内使用，开封后的试纸条应在1个月内使用完。酸价纸片上如带有红色痕迹、过氧化值纸片上如带有灰色痕迹，说明该纸片已被污染或已失效。
3.操作方法
植物油样品，可直接取适量于清洁、干燥容器中，将含药试纸端插入油样中1～2秒，立即取出并开始计时。动物油样品需加热使其融化后测试。
酸价测试纸的反应计时时间为90±5秒。
过氧化值测试纸的反应计时时间视环境温度而定，见下表。
| 环境温度（℃） | 0～4 | 5～9 | 10～19 | 20～29 | 30～36 |
| 反应时间（秒） | 90±5 | 75±5 | 60±5 | 50±5 | 40±5 |
当计时到达要求的反应时间，将试纸颜色与包装盒上的比色板进行比较。
4.结果判定
酸价纸片的测试范围在0～5.0 mg KOH/g，过氧化值的测试范围在0～50meq/Kg。
颜色相同色块下的标记数值即为样品的检测值。如试纸颜色在两色块之间，则取两者的中间值。如中间值恰巧介于卫生标准规定值时，应慎重处理。
5.我国食用油脂酸价和过氧化值卫生标准
| 品 名 | 酸价（mg KOH/g） | 过氧化值（meq/Kg） |
| 花生油、菜子油、大豆油、葵花油、胡麻油、茶油、麻油、玉米胚芽油、米糠油 | ≤4 | |
| 棉籽油 | ≤1 | |
| 色拉油 | ≤0.3 | ≤10 |
| 花生油、葵花油、米糠油 | ≤20 | |
| 菜子油、大豆油、胡麻油、玉米胚芽油、茶油、麻油、棉籽油 | ≤12 | |
| 食用煎炸油 | ≤5 | |
| 食用猪油 | ≤1.5 | ≤16 |
| 人造奶油 | ≤1 | ≤12 |
6.国际食品法典委员会规定的食用油脂酸价和过氧化值卫生标准
| 品 名 | 酸价（mg KOH/g） | 过氧化值（meq/Kg） |
| 食用植物油 | ≤0.6 | ≤10 |
| 食用猪油 | ≤1.3 | ≤10 |
| 精练猪油 | ≤2.5 | ≤16 |
| 人造黄油 | ≤2.5 | ≤16 |
| 食用牛脂 | ≤2.5 | ≤16 |
| 棕榈油 | ≤0.6 | ≤10 |
APHO-E-07-2005食用油中非食用油(桐油、大麻油、巴豆油、矿物油)的快速检测
食用植物油中含有非食用油，一是容器混用，二是运输中污染，三是人为加入等。非食用油一般都具有不同程度的毒性，食入后往往会引起中毒。食用植物油中非食用油的检测是食品安全的重点项目。
1桐油
桐油是从桐树果实中提出来的油，是一种快干性油，工业中用作油漆及涂料。桐油应用广乏。其色、味与一般食用油相似，故常有误食而中毒者
食用油中如掺有桐油，常采用三氯化锑法，亚硝酸法，及硫酸法进行检验。
方法一(三氯化锑法)GB/T5009.37-1996
操作：取油样1ml于小试管中，沿管壁小心加入“桐油鉴别试剂A”1ml，使试管中溶液分为两层，将试管置于40～50℃温水中(温度不宜过高)，加热约10分钟。如有桐油存在，在溶液分层的界面上，会出现紫红色至深咖啡色的环，加热时间延长，颜色会加深，更易观察。
说明：本法对菜油，花生油，茶子油中混杂桐油很灵敏(可达0.5%)，但豆油，棉子油存在有干扰。
方法二(亚硝酸法，需自备硫酸和石油醚)
操作：取5～10滴油样于试管中，加入2ml石油醚，使油溶解，加入3～4粒“桐油鉴别试剂B”，加入1ml硫酸(硫酸+水=1+1)，摇匀静置，在5～15分钟内观察石油醚层(上层)，若呈现白色混浊即为阳性。放置后变黄色。
说明：本方法适用于豆油、棉子油、及深色油中混杂桐油的检出，检出限0.5%。本方法不适用于芝麻油。大量青油(梓油)存在，对本法有正干扰。
方法三(硫酸法，需自备硫酸)
取油样数滴，置于白色点滴板凹穴中，加入1～2滴浓硫酸，如有桐油存在，则呈现深红色并凝为固体，同时颜色逐渐加深，最后成为黑色凝块。
2大麻油
大麻系一种有毒的大麻科植物，其果实含油在30%左右。大麻油呈棕褐色略带淡绿色。由于大麻子中含有带麻醉性的有毒成分，如四氢大麻酚，大麻二酚，大麻酚等，故食用未经处理或处理不当的大麻油，会引起中毒。可用以下4种方法检验大麻油。
方法一(盐酸—蔗糖法，需自备盐酸)
操作：取油样1ml置试管中，加入浓盐酸3～5ml，加入一次量的“大麻油鉴别试剂A”，振摇1分钟后观察，若酸层染上粉红色，静置后逐渐变成红色，示有大麻油存在。芝麻香油对本方法有干扰。
方法二(磷酸法)
操作：取油样1ml置于试管中，加入“大麻油鉴别试剂B”2ml，振摇混匀静置5分钟后观察，酸层呈现绿色，示有大麻油存在。
方法三(对二甲胺基苯甲醛法)(仅提供方法)
操作：取油样1ml置于试管中，加入1%对二甲胺基苯甲醛乙醚溶液lml，浓盐酸lml，振摇混匀，静置20分钟后观察，酸层呈现深绿色，示有大麻油存在。
方法四(薄层法)(详见GB5009.37-2003)
3青油(梓油)
青油又称梓油，柏子油，食用后会引起呕吐和腹泻。青油中含有较多的高级不饱和脂肪酸，能与溴生成不溶性的六溴化合物沉淀而被检出。
操作：取油样1ml置于试管中，加入无水乙醚1ml使其溶解。在溶液中缓缓滴人溴水，直至混合液呈鲜明红色，摇匀后置冷水浴中(15℃以下)约15分钟，取出观察，如有沉淀生成，示有青油存在。
说明：本方法检出限为2.5%，本方法对亚麻仁油，鱼油有同样反应。
4.蓖麻油
蓖麻油是一种工业和医药上的重要用油，不能食用，误食后会引起腹泻。蓖麻油能与无水乙醇以任何比例互相混合，而其它植物油不易溶于无水乙醇，故可以根据这一差别检验食油中混入蓖麻油。
操作：取油样5ml，置于有0.1ml刻度的10ml离心管中，加入5ml无水乙醇液，密塞剧烈振摇2分钟，去塞，将离心管置于离心机中，以l000转/分钟的速度，离心5分钟。取出离心管，静置30分钟后，读取离心管下部油层的体积数，如低于5ml，则表示油中掺有蓖麻油。
说明：①本方法检出限为5%(油样中含有5%以上的蓖麻油即可检出)。②巴豆油也溶于无水乙醇，结果一样，故还需用下法作巴豆油的检验。
5.巴豆油
巴豆油是一种剧毒的非食用油，把巴豆油与巴豆油鉴别试液混合后加热，在两液交界处会产生红棕色的环，可作为鉴别巴豆油的项目之一。
操作：取一支试管，加入3ml“巴豆油鉴别试液”。另取一支试管，将1ml油样注入其中，加入无水乙醇液5ml，充分混匀后，将此溶液沿试管壁慢慢加到盛有“巴豆油鉴别试液”的试管中，将此试管置40～50℃温水中加热30分钟，如在两液界面处出现棕色环，示有巴豆油存在。
注意：①本方法检出限为2.5%。②棉子油，菜子油，豆油有时也会产生淡红色环，但与巴豆油红棕色环很容易区别。③因掺巴豆油的多少，色环的颜色由红棕→棕黑色。④注意：“巴豆油鉴别试剂”为强碱溶液，一旦溅入眼内，要用大量清水冲洗。
6.矿物油
矿物油来源于石油分馏的产物，属于较高级的直链烷烃，而食用油脂系高级脂肪酸的甘油酯，尽管外观有某些相似，但其化学性质有很大的差别。
方法一
取1滴油样于比色管中，加5滴“矿物油鉴别试剂(强碱溶液，谨慎操作)”和5ml无水乙醇，不加盖，于80～100℃水中加热(或将开水倒入烧杯中，将比色管放入水中)10分钟，加热过程中随时轻轻摇动，取出时乙醇容量不要少于4ml，加入5ml蒸馏水或纯净水，若发生混浊为阳性，其浊度随矿物油的浓度增加而加大。其最低检出量为0.1%。如果油中混有硬度较大的水时，也会发生混浊，久放产生沉淀；混有矿物油时久放析出透明油滴浮于液面。操作中可用矿物油阴性样品作对照试验。
方法二(仅提供方法)
取根据矿物油在紫外光照射下能发生荧光，而植物油无此性质。据此可以检验出矿物油。
操作：取油样及己掺有矿物油的对照油各1滴，分别滴于两张白色滤纸片上，置紫外光下观察.油样与对照油样出现青色荧光，则表示油样中掺有矿物油。
方法三(需要蒸馏装置)
作为食用油脂的高级脂肪酸的甘油酯，可以在碱性条件下发生水解反应(即皂化反应)，其产物皆易溶于水。而矿物油则不能皂化，也不溶于水。据此性质即可通过皂化反应来检验矿物油。
操作：把1ml油样置于100ml的三角瓶里，加入1ml“矿物油鉴别试剂”和20ml无水乙醇。接上空气冷凝管。将三角瓶置于沸水浴中。加热回流5分钟，皂化过程中，随时振摇。皂化后，加入25ml沸水，混合均匀。溶液如呈浑浊，或有油状物浮起，示有矿物油存在。 APHO-E-08-2005瘦肉精(盐酸克伦特罗)的快速检测
本方法是一种检测盐酸克伦特罗(俗称：瘦肉精)的快速筛选方法，适用于猪肉肝脏、肺脏、肾脏、瘦肉样品的检测。样本渗出液的检出限为3ng/ml。
1、检测原理
样本中的“瘦肉精”在流动的过程中与胶体金(或胶体硒)标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和NC膜检测线上“瘦肉精”-蛋白偶联物的结合。如果样本渗出液中“瘦肉精”含量大于3ng/ml，检测线不显颜色，结果为阳性。反之，检测线显红色，结果为阴性。
2、试剂组成
“瘦肉精”快速检测卡；展开液；一次性塑料吸管；一次性塑料手套；对照液。
3、标本收集
肉及内脏样本(包括精肉、肝脏、肺脏和肾脏)立即检测或收集在塑料袋中送检。若不能及时检测，样本在2-8℃冷藏可保存24小时，-20℃冷冻保存1周，冷冻时忌反复冻融。
4、操作步骤以及结果判读：
⑴测试前将未开封的检测卡恢复至室温。
⑵将瘦肉或内脏样本剪碎，装入1.5ml离心管中，盖紧管盖。放入沸水浴中加热5分钟以上使有液汁浸出，取出离心管放至室温。
⑶从铝箔袋中取出检测卡(在一小时内使用)。
⑷将检测卡平放于台面，用塑料吸管垂直滴加1滴无气泡的样本渗出液(约20-30ul)于加样孔，30秒后再加入展开液2-3滴(约60-80ul)。
⑸反应10min后，展开区出现紫色条带为阴性结果，无条带者为阳性结果。
5、注意事项：
⑴检测卡在室温下一次性使用。
⑵脂肪会导致假阳性结果，取样时请弃去肉眼可见的脂肪部分。
⑶检测时避免阳光直射。
⑷出现阳性结果，应用本卡复查并作阳性对照实验。必要时送实验室进一步定量。
⑸附带的瘦肉精阳性对照液为5ng/ml。
