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wb免疫印迹法的主要显色方法有哪些

2020.5.19

  Western免疫印迹(WesternBlot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。

banquan11.jpeg

  western显色的方法主要有以下几种:

  i.放射自显影

  ii.底物化学发光ECL

  iii.底物荧光ECF

  iv.底物DAB呈色

  现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色,体同水平和实验条件的是用第一种方法,目前发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行,操作也比较简单,原理如下(二抗用HRP标记):反应底物为过氧化物+鲁米诺,如遇到HRP,即发光,可使胶片曝光,就可洗出条带。

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