肥达氏试验

2020.8.18

实验方法原理将已知的伤寒杆菌“O”抗原、“H”抗原和甲型、乙型副伤寒杆菌“H”抗原与病人血清混合作试管定量凝集试验，以检测病人血清中的相应抗体，临床上作为诊断伤寒和副伤寒的参考依据。

仪器、耗材待检血清诊断菌液蒸馏水试管试管架微量移液器吸管水浴箱

实验步骤

1. 将大小一致的小试管放置试管架，4排，每排8支，作好标记。

2. 在所有32支试管中分别加入生理盐水0.5ml。

3. 另取1支试管，加生理盐水1.8ml和病人血清0.2ml，充分混匀，得到1：10稀释血清。在每排第1管中分别加入该1：10稀释血清0.5ml，充分混匀，即得1：20稀释血清。

4. 对倍稀释病人血清：分别从每排第1管中取0.5ml血清加入本排第2管，混匀，再从第2管吸取0.5ml血清加入第3管，混匀。依次类推，直至每排第7管中加入稀释血清0.5ml，混匀后从每排第7管中吸取0.5ml丢弃。从而每排1～7管得到1：20、1：40、1：80、1：160、1：320、1：640、1：1280的对倍稀释血清。第8管不加血清，只加生理盐水作阴性对照。

5. 加入菌液：各排从第8管开始，由后往前每管加入诊断菌液0.5ml。

第1排各管加入伤寒杆菌“H”菌液。

第2排各管加入伤寒杆菌“O”菌液。

第3排各管加入甲型副伤寒杆菌“H”菌液。

第4排各管加入乙型副伤寒杆菌“H”菌液。

此时，各血清管的血清稀释度又增加了1倍，依次为1：40、1：80、1：160、1：320、1：640、1：1280、1：2560，每管总量为1ml。

其他

结果判定与书写

根据凝集反应的强弱，分别用“＋＋＋＋”、“＋＋＋”、“＋＋”、“＋”和“－”表示。

1. ＋＋＋＋：完全凝集，上层液体清澈透亮，细菌完全凝集沉淀于管底。

2. ＋＋＋：大部分凝集，上层液体基本透明，细菌大部分（75%）凝集沉淀于管底。

3. ＋＋：中度凝集，上层液体半透明，管底有明显凝集沉淀物。