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免疫印迹与免疫检测实验——发光底物显迹

2019.4.07
实验材料

蛋白质

试剂、试剂盒

Tris缓冲液发光底物显迹液PBS磷酸盐

仪器、耗材

保鲜膜摇床

实验步骤

1.  用50 ml 底物缓冲液洗膜两次以平衡膜,每次15 min。

 

2.  对于使用硝酸纤维素膜或PVDF膜进行的碱性磷酸酶反应:膜置于Nitro-Block溶液中5 min,然后以50 ml 底物缓冲液洗5 min。

 

3.  将膜移入显迹液中,浸泡30 s 或5 min。

4.  取出膜,滴干水份,将膜正面朝下放在一张透明的塑料保鲜膜上,向后折叠用保鲜膜将膜紧密包裹起来。

 

5.  在暗房中,将膜正面朝下放在感光胶片上,曝光时间取决于样品,放射自显影几秒或过夜。

 

6.  如果需要,可用50 ml TBS溶液洗膜15 min,再进行发色显迹。


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