同样是稳定株,单克隆和混合克隆如何选择?
单克隆稳定株:来源于含有稳定整合外源片段的单个细胞的扩增。
混合稳定株:由多个单克隆稳定株混合构成的克隆群,不同的单克隆其外源片段的整合位点不一样。
由于不同细胞基因组背景存在差异,且不同整合位点的单克隆细胞株表现出来的细胞表型可能不一致,所以使用混合克隆株更能去除细胞间差异造成的干扰,否则需要对多个单克隆稳定株进行比较,才能获得更精确的实验数据。
为了去除细胞间差异,得到更精确的实验结果,我们推荐您使用慢病毒感染,或者构建混合克隆稳定株!
● 感染效率70%~80%以上即可直接实验,不会受到质疑
● 高分低分文献都使用混合克隆,国际承认
● 筛选单克隆株至少要用两株细胞来去除细胞间差异,工作量翻倍,不划算
比如下面这篇5分文章,花了2个月构建稳定株,再吭哧吭哧把细胞功能学、动物实验都做了两遍。不但要保证两个单克隆株目的基因表达量一致,功能实验结果也要类似哦!要是不一致怎么办?换一株再重复呀,真是给自己挖了一大坑!
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