单个核细胞(MNCs)获取实验
实验方法原理
实验材料 脐血
试剂、试剂盒 灭菌合适的培养基或冷冻液PBSA
仪器、耗材 Ficoll-Hypague(密度1.077g L)巴氏吸管50mL离心管
实验步骤
(a) 将脐血样品用PBSA按1:1比例稀释。
(b) 将15mLFicoll-Hypague吸入50mL离心管。
(c) 将30mLPBSA稀释的脐血样品缓慢地加到Ficoll-Hypague上。
(d) 室温450g离心20〜30min。
(e) 离心后,在Ficoll-Hypague液面上明显可见一层细胞,是密度低于FicoIlHypague液的单个核细胞层。
(f) 用巴氏吸管,将单个核细胞层吸出,转移到另一离心管中。
(g) 用PBSA洗细胞,室温200g离心10min。
(h) 倒掉上清,用PBSA重悬细胞,洗细胞,重复上述步骤(g)。
(i) 最后,用合适的培养基重悬细胞(冰冻液或培养基)
推荐