反向PCR引物设计需要同源臂吗
需要。
用pcr扩的时候就把同源重组片段引入,vector酶切后5端选15nt,3'端选15nt分别加到正向引物和反向引物上,就做成了同源臂。同源序列是指在同一物种不同个体间或不同物种间相同或相似的DNA序列,而同源臂是指一段同源序列,类似于trna氨基酸臂的结构,所谓臂,指的是手臂样结构。
引物是人工合成的两个寡核苷酸序列:一个引物与靶区域端的一条dna模板链互补,另一个引物与靶区域另一端的另条dna模板链互补,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3端开始合成新的核酸链。
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