秋水仙碱的检查方法
有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。避光操作。供试品溶液取本品适量,加水-甲醇(1:1)溶解并稀释制成每1ml中约含1mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液适量,用水甲醇(1:1)定量稀释制成每1ml中含10μg的溶液灵敏度溶液精密量取供试品溶液适量,用水-甲醇(1:1)定量稀释制成每1ml中含0.5g的溶液色谱条件用辛基硅烷键合硅胶为填充剂,以水为流动相A,以甲醇水(55:45)为流动相B,流速为每分钟1.0ml,检测波长为254nm;进样体积20pl;先以流动相A流动相B(30:70)等度洗脱,柱温20℃,待秋水仙碱峰洗脱完毕后立即按下表进行梯度洗脱。时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)柱温(℃)70-9010~109030系统适用性要求理论板数按秋水仙碱峰计算不低于5000,杂质Ⅰ峰(相对保留时间约为0.9)与秋水仙碱峰的分离度应符合要求;灵敏度溶液色谱图中,秋水仙碱色谱峰信噪比不小于10。测定法精密量取供试品溶液、对照溶液与灵敏度溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图至秋水仙碱峰保留时间的2.5倍限度供试品溶液色谱图中,杂质I的峰面积不得大于对照溶液主峰面积的3.5倍(3.5%),其他单个杂质峰面积均不得大于对照溶液主峰面积(1.0%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的5倍(5.0%),小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计,去甲秋水仙碱取本品0.05g,加水5ml溶解后,加三氯化铁试液0.1ml,摇匀,如显绿色,与同体积的对照溶液(取比色用氯化钴液1ml、比色用重铬酸钾液1.5ml与比色用硫酸铜液2.5ml,摇匀,即得)比较,不得更深残留溶剂照残留溶剂测定法(通则0861第一法)测定供试品溶液取本品约0.3g,精密称定,置20ml顶空瓶中,精密加水10ml使溶解,密封,对照品溶液分别取乙酸乙酯与三氯甲烷各适量,精密称定,加水定量稀释制成每1ml中约含0.75mg与3g的混合溶液,精密量取10ml,置20ml顶空瓶中,密封色谱条件以聚乙二醇(PEG20M)(或极性相近)为固定液,柱温为75℃,进样口温度为200℃,检测器温度为250℃顶空瓶平衡温度为80℃,平衡时间为30分钟。系统适用性要求对照品溶液色谱图中,乙酸乙酯峰与三氯甲烷峰分离度应符合要求测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液分别顶空进样,记录色谱图。限度按外标法以峰面积计算,含乙酸乙酯不得过6.0%,含三氯甲烷不得过0.01%水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法1)测定含水分不得过2.0%炽灼残渣不得过0.1%(通则0841)
