维生素K1的含量测定方法
含量测定
照高效液相色谱法(通则0512)测定。避光操作。内标溶液取苯甲酸胆甾酯约37.5mg,置25ml量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀。供试品溶液取本品约20mg,精密称定,置50ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml与内标溶液1ml,置10ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。对照品溶液取维生素K1对照品约20mg,精密称定,置50ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml与内标溶液1ml,置10m1量瓶中,用流动相稀释至刻度摇匀。色谱条件用硅胶为填充剂;以石油醚(60~90℃)-正戊醇(2000:2.5)为流动相;检测波长为254nm;进样体积10l系统适用性要求维生素K1的顺、反式异构体峰之间及顺式异构体峰与内标物质峰之间的分离度均应符合要求测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图。按内标法以顺、反式异构体峰面积的和计算。
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