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酵母菌基因组DNA的提取实验

2019.9.10

  • 基本方案

           

实验材料

酵母菌

试剂、试剂盒

SE缓冲液 山梨醇 EDTA 溶菌酶 PVP 蛋白酶K缓冲液 Tris

仪器、耗材

高速冷冻离心机 台式离心机 恒温水浴 低温冰箱 冷冻真空干燥器 取液器 电泳仪 水平电泳槽 紫外观测仪

实验步骤

1.  1.5 ml  对数生长期细菌细胞。


2.  离心,12 000 rpm,1-2 min。


3.  沉淀。

4.  溶于590 ul SE缓冲液中混匀+10 ul 溶菌酶37℃,1 hr。


5.  离心,12 000 rpm,8~10 min。


6.  沉淀。


7.  溶于100 μL,0.5 μl 蛋白酶K,混匀,37℃,1 hr。


8.  加入1.2 ml 的CTAB/NaCL,200 μl 2 0%PVP 混匀  65℃,30 min。


9.  等体积酚/氯仿/异戊醇混合液,混匀。


10.  离心,12 000 rpm,4~5 min。

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